【摘 要】
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目的:探讨长链非编码RNATTTY15(LncRNATTTY15)对高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:高糖诱导H9c2细胞后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测H9c2细胞中TTT
【机 构】
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聊城市第二人民医院内分泌科,山东聊城 252600;聊城市第二人民医院心内科,山东聊城 252600
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目的:探讨长链非编码RNATTTY15(LncRNATTTY15)对高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:高糖诱导H9c2细胞后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测H9c2细胞中TTTY15和miR-520a-3p水平,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白印迹(Western blotting)法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和活化的半胱天冬酶-3(C-caspase-3)蛋白水平.转染TTTY15小干扰RNA或miR-520a-3p模拟物至H9c2细胞,用上述相同方法观察下调TTTY15或上调miR-520a-3p对高糖诱导的H9c2细胞存活率、凋亡率以及cyclin D1和C-caspase-3蛋白表达的影响.双荧光素酶报告基因实验验证TTTY15与miR-520a-3p调控关系.结果:高糖促进了 H9c2细胞中TTTY15表达、细胞凋亡率及C-caspase-3蛋白表达(P＜0.05),降低了 H9c2细胞存活率、miR-520a-3p表达及cyclin D1蛋白表达(P＜0.05).下调TTTY15或上调miR-520a-3p可提高高糖诱导的H9c2细胞存活率及cyclin D1蛋白水平(P＜0.05),降低细胞凋亡率和C-caspase-3蛋白水平(P＜0.05).TTTY15在H9c2细胞中靶向负调控miR-520a-3p表达.下调miR-520a-3p可逆转下调TTTY15对H9c2细胞存活率、凋亡率及cyclin D1和C-caspase-3蛋白表达的影响.结论:TTTY15可能通过下调细胞中miR-520a-3p表达抑制高糖诱导的H9c2细胞增殖并促进细胞凋亡.
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