对虾白斑病毒VP15基因的RNA干扰体外研究

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VP15是南美白对虾WSSV病毒的一个核衣壳蛋白基因。采用体外干扰实验筛选对VP15具有针对性的siRNA。实验构建了真核表达载体pEGFP—VP15,并将设计的siRNA以及pEGFP—VP15共转染BHK细胞。采用Western blot方法检测GFP—VP15融合蛋白的表达,半定量RT—PCR方法检验siRNA抑制VP15基因转录的效果。实验结果表明,pEGFP—VP15在PK细胞正常表达,设计的3对siRNA对GFP—VP15的mRNA转录均有不同程度的干扰效果;其中,siRNAI的干扰效果最为显
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