【摘 要】
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目的观察黄芩苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法不同浓度(5、10、20、40、80和160μg/mL)的黄芩苷作用于人宫颈癌HeLa细胞24、48和72h后,采用C
【机 构】
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胜利油田中心医院妇科,山东省医学科学院基础医学研究所,济南大学医学与生命科学学院山东省罕少见病重点实验室卫生部生物技术药物重点实验室山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室,
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目的观察黄芩苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法不同浓度(5、10、20、40、80和160μg/mL)的黄芩苷作用于人宫颈癌HeLa细胞24、48和72h后,采用CCK-8法检测黄芩苷对HeLa细胞增殖的影响;40μg/mL黄芩苷作用于HeLa细胞24h后,采用普通光学显微镜观察细胞形态学变化,Hoechst 33342染色后在荧光倒置显微镜下观察细胞核形态学改变;AnnexinⅤ/PI双染后采用流式细胞术检测细胞凋亡的改变;蛋白质印迹法检测Caspase家族中Caspase-3、-8、-9蛋白表达变化。结果黄芩苷可明显抑制HeLa细胞增殖,随时间延长及剂量增加,细胞增殖抑制率也明显升高,P<0.05;经40μg/mL黄芩苷处理24h的HeLa细胞明显变小、变圆、且有凋亡小体产生,细胞核固缩、碎裂,呈现典型的凋亡形态学改变;40μg/mL黄芩苷处理HeLa细胞24、48h后细胞早期凋亡率分别为(10.5±1.5)%、(21.8±2.4)%,与对照组的(1.3±0.9)%相比,差异均有统计学意义,P<0.05;蛋白质印迹检测法结果表明,黄芩苷处理后Caspase-3蛋白由0.09上调至0.65,Caspase-8蛋白由0.04上调至1.22,Caspase-9蛋白由0.12上调至1.10,提示剪切片段蛋白的表达呈上调趋势。结论黄芩苷可抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与激活Caspase相关。
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