【摘 要】
：
目的 构建刚地弓形虫棒状体蛋白16(TgROP16)真核重组表达载体,对TgROP16基因编码蛋白进行生物信息学分析. 方法 提取刚地弓形虫总RNA,根据TgROP16基因的开放阅读框架设计引物
【机 构】
：
河北北方学院病原生物学与免疫学研究所,河北张家口,075000
论文部分内容阅读
目的 构建刚地弓形虫棒状体蛋白16(TgROP16)真核重组表达载体,对TgROP16基因编码蛋白进行生物信息学分析. 方法 提取刚地弓形虫总RNA,根据TgROP16基因的开放阅读框架设计引物,采用逆转录PCR(RT-PCR)扩增ROP16基因,经EcoR I、Not I酶切后连接入真核表达载体pVAX1中,连接产物转化大肠埃希菌(E.coli)XL1-Blue.提取阳性菌落质粒,进行PCR、双酶切鉴定及基因测序,对所获序列进行生物信息学分析. 结果 TgROP基因RT-PCR扩增产物与预期一致,大小约为2 100 bp.重组质粒经PCR及双酶切鉴定构建正确.测序显示获得的TgROP16基因片段为2 124 bp,与GenBank已收录的弓形虫ROP16基因序列(登录号为GQ249093.1)比对,一致性为99.8％.预测其编码蛋白TgROP16为非跨膜分泌蛋白,含707个氨基酸,分子式为C3343H5339N967O1024S2,分子质量单位为76.1352 ku,理论等电点为9.18;在TgROP16蛋白的二级结构中α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲分别占比35.79％、14.29％、7.07％和42.86％;含多个可形成卷曲螺旋构象的区域与可成为磷酸化位点的氨基酸残基,存在信号肽序列,含39个B细胞抗原表位、24个CTL细胞抗原表位及33个Th细胞抗原表位. 结论 成功构建了pVAX1ROP16真核表达重组质粒,生物信息学分析表明其编码蛋白TgROP16具有良好的抗原性及免疫原性,有望作为弓形虫疫苗候选分子.
其他文献
目的研究肝泡型包虫病患者肝脏细胞Gadd45β(growth arrest and DNA damage gene 45β)及细胞周期调控相关基因的表达及意义。方法采集24例肝泡型包虫病患者肝脏标本,分为病
在对桥梁进行竣工验收或检测中,观测桥梁加载后的挠度变形是必须进行的测试项目.由于各座桥梁的结构、材质以及跨径大小的不同,其挠度变形量区别很大;而随着科技的发展,各种
遥感技术的快速发展使其在城市交通领域中的应用越来越广泛,城市交通遥感(RS-T)应作为一个独立的领域进行系统研究,我们建议将其命名为RS-T.本文对遥感在城市交通社会经济基
大肠癌是世界第大三高发癌症,因结肠癌死亡的患者每年可达60万.大肠癌的发生与许多因素相关,包括饮食、炎症、生活方式和肠道菌群构成等.研究表明约三分之一的癌症与宿主微生
胸腺瘤是前纵隔最多见的原发肿瘤,其起源于胸腺网状上皮细胞,约占纵隔肿瘤的20%~40%~([1]),其中40~50岁为高发年龄,女性发病率略高于男性,儿童恶性较多。约90%的胸腺瘤位于前
目的研究细粒棘球绦虫原头节可溶性抗原(protoscolex soluble antigens,PSA)对树突状细胞(dendritic cells,DC)表型分化及分泌炎症因子的影响,探索寄生虫对宿主免疫逃避的机
本文详尽阐述了地理信息系统和遥感技术的研究现状,其发展趋势为3S技术与多种技术相结合应用,才能实现其产业化发展.
目的 了解2011-2014年老年患者下呼吸道感染病原菌分布及耐药特点,为临床抗生素的合理应用提供科学依据. 方法 对武汉中心医院2011-2014年720例老年下呼吸道感染住院患者的临
为确保大桥斜拉索和主梁线形接近设计线形,从坐标计算控制器和定位测量的组织实施.本文详细介绍了润扬大桥北汉斜拉桥索道管安装定位的过程和方法,并说明此定位测量方法是可
本文结合汉宜高速公路加铺工程实践,介绍了高速公路工程测量中长度变形控制问题、GPS高程拟合和坐标转换等几个技术问题.