【摘 要】
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目的 探讨体外不同浓度葡萄糖对红细胞能量代谢的影响及其分子机制.方法 采集6例健康成人新鲜抗凝血,离心去除白细胞和血浆,用PBS重悬洗涤红细胞3次后,将6组红细胞轻轻混匀后
【机 构】
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包头医学院生物化学与分子生物学教研室,包头014000内蒙古医科大学第一附属医院内分泌科,呼和浩特010000;包头医学院临床学院,包头014000;包头医学院第一附属医院检验科,包头014000;
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目的 探讨体外不同浓度葡萄糖对红细胞能量代谢的影响及其分子机制.方法 采集6例健康成人新鲜抗凝血,离心去除白细胞和血浆,用PBS重悬洗涤红细胞3次后,将6组红细胞轻轻混匀后再分为4组,分别向其中加入D-葡萄糖溶液,使其终浓度分别为0、6、20、30 mmol/L,于37℃培养0、24、48 h后,取部分红细胞悬液利用流式细胞仪及多功能酶标仪检测红细胞内ATP含量、己糖激酶(HK)活性、丙酮酸激酶(PK)活性、活性氧(ROS)含量及红细胞衰亡率.实验结果采用单因素方差分析进行组间变量比较.结果 与对应时间点的0 mmol/L组比较,用浓度为6、20、30 mmol/L的葡萄糖孵育红细胞24和48 h后,红细胞内HK活性、PK活性、ATP含量均增加,且随着葡萄糖浓度增加呈上升趋势,差异有统计学意义(P＜0.05);而ROS含量和红细胞衰亡率是降低的,且随葡萄糖浓度增加而降低,差异有统计学意义(P＜0.05).用不同浓度葡萄糖(浓度分别为0、6、20、30mmol/L)培养红细胞48 h后,各不同浓度组红细胞内ROS含量和红细胞衰亡率随着孵育时间延长而增加,与对应浓度组的0h比较,差异有统计学意义(P＜0.05);HK活性和PK活性逐渐降低,与对应浓度组的0h比较,差异有统计学意义(P＜0.05).而ATP含量呈波动式下降,与对应浓度组的0h比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 红细胞体外短期高糖培养,不仅会加强红细胞内能量代谢,而且会降低氧化应激及衰亡发生率,而没有葡萄糖供应会导致红细胞内ATP不断被消耗,氧化应激增强,衰亡增多.
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