植物表达载体pCAMBIA2301-del-ros的构建及其在草莓上的验证

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yjddstevens
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为了研究多基因互作,减少多次转化的不确定性,本研究在花青素合成调节基因del(delila)和ros(rosea1)的上下游分别引入CaMV 35S启动子和nos终止子,以pBI121-del和pCAMBIA1301-ros做中间载体,并利用BamHⅠ和BglⅡ产生相同4碱基末端的片段,在连接酶的作用下将CaMV 35S启动子分别驱动的del和ros基因构建在同一个植物表达载体pCAMBIA2301上,利用所构建的载体pCAMBIA2301-delros通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404介导的方法转化草莓(Fragaria ananassa Duch.),并进行PCR检测,获得转基因草莓。通过组织观察发现,转基因草莓的根和叶的颜色变成红紫色;实时RT-PCR分析表明,在转基因草莓中花青素合成的结构基因花色素合成酶(anthocyanidinsynthase,ANS)、查尔酮异构酶(chalcone-flavanone isomerase,CHI)、查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS)、二羟黄酮醇-4-还原酶(dihydroflavonol-4-reductase,DFR)、黄烷酮-3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase,F3H)和类黄酮-3-O-葡糖基转移酶(UDP glucose-flavonoid 3-O-glcosyl-transferase,UFGT)在转基因株系中的表达均上调,这也进一步证实通过该方法构建的植物表达载体pCAMBIA2301-del-ros可以用来转化植物。本研究结果表明,植物表达载体pCAMBIA2301-del-ros成功构建,为多基因植物表达载体的构建提供了一种思路,也为在植物体内同时研究多个基因的互作提供借鉴。
其他文献
网络环境下,主题法将成为文献主要的标引与检索工具,并成为我国文献分类的主要手段,在对文献进行主题标引的过程中,往往会出现很多的偏差,造成文献的漏检。文章对文献主题标引工作
<正> 云南农业发展历史早而自然环境开发晚,各地区农业生产发展水平差异十分显著。研究云南历史时期农业发展与农业区演变过程是一项基础工作,它可以为现阶段农业生产的发展
本文是对于新世纪音乐文学形象的初始探索。"音乐文学"从广义上包含一切与音乐相关联的文艺作品。狭义上讲的是歌词艺术。本文以歌词为主要研究对象,深入探讨其形象的建构。
高职院校图书馆是为学校的教学教研服务的,最大限度地满足读者的需求是图书馆追求的目标。文章从读者认知、情感、意志过程和读者个性心理探讨读者心理状况,提出相应的图书馆建
连江县地处福建省东南沿海、闽江口北岸。近年来,连江县农村非法占地现象突出,农村非法占地多发、频发,造成了大量耕地损毁,影响了建设用地管理秩序,土地资源的无序使用程度
同志们:$$我代表中共黄冈市第五届纪律检查委员会常务委员会向第四次全体会议报告工作,请予审议。$$2018年,全市各级纪检监察机关高举习近平新时代中国特色社会主义思想伟大旗帜
报纸
学生的心理健康教育问题一直是当前教育的焦点话题,尤其是寄宿制小学学生的心理健康教育问题。寄宿制小学的学生很容易出现各种心理健康问题。本文浅要分析了寄宿制小学学生出
开展国际商务合作离不开翻译工作,即口译或笔译。但翻译并不仅仅意味着将一种语言简单转化为另一种语言,而是一个涉及到语言基础、专业知识和跨文化意识甚至跨文化交际能力的