论文部分内容阅读
目的:探讨烟酰胺单核苷酸（NMN）对糖尿病肾病（DN）大鼠肾细胞纤维性变的作用,阐明NMN通过沉默信息调节因子1 （Sirt1）和AKT途径缓解肾实质细胞纤维化的机制。方法:采用链脲佐菌素（STZ）制备SD大鼠2型糖尿病模型,模型大鼠随机分为实验组（n=30）和对照组（n=10）:实验组大鼠分为糖尿病+NMN组（n=15,连续皮下注射NMN）和糖尿病+PBS组（n=15,大鼠注射200μL无菌PBS）,之后断头处死大鼠,取肾脏组织进行切片和蛋白提取,Westen blotting法和免疫共聚焦法检测2组大鼠肾小球细胞中Sirt1、AKT、p-FoxO3a和Cav-1蛋白表达水平。采用高浓度葡萄糖(200mmol·L-1)处理大鼠肾小球系膜HBZY-1细胞36d后,随机将培养细胞分为4组(分别给予0、50、100和200μmol·L-1 NMN),以给予5.6mmol·L-1葡萄糖不给予NMN的细胞作为对照组,继续培养24h后收集细胞提取蛋白,采用Westen blotting法检测各组HBZY-1细胞中Sirt1、AKT和p-FoxO3a蛋白表达水平。结果:与糖尿病+PBS组比较,糖尿病+NMN组大鼠肾实质细胞中Sirt1和AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,糖尿病+NMN组大鼠肾实质细胞中p-FoxO3a和Cav-1蛋白表达水平升高（P<0.01）。与对照组(给予5.6mmol·L-1葡萄糖)比较,50μmol·L-1 NMN组HBZY-1细胞中Sirt1和AKT蛋白表达水平升高（P<0.05）,100和200μmol·L-1 NMN组HBZY-1细胞中Sirt1、AKT和p-FoxO3蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。结论:NMN能够通过调节Sirt1与AKT蛋白表达提高DN大鼠肾小球细胞中内源性p-FoxO3a和Cav-1蛋白表达,NMN及其类似物可能具有潜在预防或治疗DN大鼠肾小球纤维化的作用。