【摘 要】
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研发能阻断免疫检查点程序性死亡分子1/程序性死亡配体1 (PD-1/PD-L1)相互作用的小分子药物是下一代肿瘤免疫疗法的新方向.本研究对金丝桃苷下调非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中PD-L1表达发挥抗肿瘤作用及机制进行了研究.利用Western blot、流式细胞术、PD-1/PD-L1相互作用分析检测金丝桃苷对NSCLC细胞内和细胞膜表面PD-L1蛋白表达水平的影响;荧光定量PCR和Western blot检测金丝桃苷对PD-L1 mRNA和c-Myc蛋白的影响;细胞阻抗法和结晶紫法检测金丝桃苷对共培
【机 构】
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中国医学科学院、北京协和医学院医药生物技术研究所,北京100050
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研发能阻断免疫检查点程序性死亡分子1/程序性死亡配体1 (PD-1/PD-L1)相互作用的小分子药物是下一代肿瘤免疫疗法的新方向.本研究对金丝桃苷下调非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中PD-L1表达发挥抗肿瘤作用及机制进行了研究.利用Western blot、流式细胞术、PD-1/PD-L1相互作用分析检测金丝桃苷对NSCLC细胞内和细胞膜表面PD-L1蛋白表达水平的影响;荧光定量PCR和Western blot检测金丝桃苷对PD-L1 mRNA和c-Myc蛋白的影响;细胞阻抗法和结晶紫法检测金丝桃苷对共培养T细胞杀伤肿瘤细胞的效果;Lewis荷瘤小鼠检测金丝桃苷的体内抑瘤效果.结果 表明,金丝桃苷能分别以浓度依赖性和时间依赖性方式下调H1975、HCC827细胞中以及细胞膜表面PD-L1的水平,这与其抑制NSCLC细胞中PD-L1 mRNA的表达水平有关.机制研究发现,金丝桃苷可降低H1975、HCC827细胞中转录因子c-Myc的蛋白表达量,从而在转录水平下调PD-L1的表达.此外,金丝桃苷可促进共培养的T细胞对H1975细胞的杀伤作用.小鼠荷瘤实验证实(所有动物实验均遵循中国医学科学院医药生物技术研究所伦理委员会的规定),金丝桃苷可显著抑制C57BL/6小鼠中Lewis移植瘤的生长.25 mg·kg-1金丝桃苷处理荷瘤小鼠后,可使瘤体积减小48.3％.以上结果说明,金丝桃苷通过降低NSCLC细胞中c-Myc的蛋白表达量,在转录水平抑制PD-L1的表达,从而发挥抗肿瘤作用.本研究为金丝桃苷在肿瘤免疫治疗中的潜在应用奠定了基础.
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