实时荧光定量PCR方法诊断马尔尼菲青霉病方法的建立

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目的:建立马尔尼菲青霉病血清实时荧光定量PCR诊断方法,对马尔尼菲青霉DNA行绝对定量.方法:针对马尔尼菲青霉内转录间隔区设计特异引物和Taqman探针,对马尔尼菲青霉、16种常见致病真菌、2种常见致病细菌和人基因组DNA行实时荧光定量PCR扩增,检测其特异性;以10倍浓度梯度的重组质粒为标准品,检测其敏感性.结果:该PCR方法特异度达100%;该方法最低检测限介于5~10 copies之间.结论:实时荧光定量PCR方法有助于早期、特异地诊断马尔尼菲青霉病.
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