【摘 要】
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目的 探讨草苁蓉多糖(Boschniakia rossica polysaccharides,BRPS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的 RAW264.7巨噬细胞炎症反应的影响.方法 体外利用LPS刺激RAW264.7细胞,建立巨噬细胞炎症模型.将巨噬细胞随机分为正常组、模型组、BRPS低、中、高剂量组(BRPS质量浓度分别为25、50、100 mg·L-1).采用细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞活力;酶联免疫吸附法(enzym
【机 构】
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延边大学医学院,吉林延吉133002
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目的 探讨草苁蓉多糖(Boschniakia rossica polysaccharides,BRPS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的 RAW264.7巨噬细胞炎症反应的影响.方法 体外利用LPS刺激RAW264.7细胞,建立巨噬细胞炎症模型.将巨噬细胞随机分为正常组、模型组、BRPS低、中、高剂量组(BRPS质量浓度分别为25、50、100 mg·L-1).采用细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞活力;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的分泌;采用 Western blot 法检测环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、白介素-1 受体相关激酶 1(interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1)蛋白的表达以及核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)、信号传导与转录激活因子-3(signal transducers and activators of transcription-3,STAT3)蛋白的活化水平.结果 LPS在100～2 000μg·L-1内对RAW264.7细胞活力无影响;但能够显著上调RAW264.7细胞COX-2蛋白的表达,提示巨噬细胞炎症模型构建成功.BRPS在0～100 mg.L-1内对RAW264.7细胞活力无影响,不显示细胞毒性;但能够下调LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌.与模型组比较,BRPS低、中、高剂量组细胞对IL-1β分泌的抑制率分别为14.2％、47.6％、72.4％,对IL-6分泌的抑制率分别为5.5％、22.2％、45.1％,对TNF-α分泌的抑制率分别为9.5％、29.1％、55.3％.同时,BRPS能够抑制LPS诱导的COX-2蛋白表达,抑制MyD88、IRAK1蛋白表达,抑制NF-KB p65的磷酸化和核内转移,抑制ERK、JNK、p38磷酸化以及STAT3磷酸化.结论 BRPS对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应具有抑制作用,其作用可能与其抑制NF-κB、MAPK、STAT3活化有关.
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