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目的对人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophagecolonystimulatingfactor,GM-CSF)cDNA5′端进行修饰以实现在大肠杆菌中的高效表达。方法采用PCR方法进行插入和定点突变,转化大肠杆菌实现原核系统表达。通过细胞和生物学方法对表达产物进行鉴定。结果修饰后基因的氨基酸序列与文献报道完全一致,重组蛋白表达量占菌体总蛋白的25%;重组蛋白可刺激体外培养的TF-1细胞生长和细胞集落形成;其蛋白比活达到1.5×107/mg。氨基酸N末端序列分析表明,前16位氨基酸序列与天然序列完全一致。结论对GM-CSFcDNA5′端进行修饰可有效地提高N末端启始区的翻译效率,从而实现在大肠杆菌中的高效表达。获得具有生物学活性的重组蛋白。