人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的基因修饰及其在大肠杆菌中的高效表达

来源 :中国医学科学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zmyswzzxp123654
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的对人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophagecolonystimulatingfactor,GM-CSF)cDNA5′端进行修饰以实现在大肠杆菌中的高效表达。方法采用PCR方法进行插入和定点突变,转化大肠杆菌实现原核系统表达。通过细胞和生物学方法对表达产物进行鉴定。结果修饰后基因的氨基酸序列与文献报道完全一致,重组蛋白表达量占菌体总蛋白的25%;重组蛋白可刺激体外培养的TF-1细胞生长和细胞集落形成;其蛋白比活达到1.5×107/mg。氨基酸N末端序列分析表明,前16位氨基酸序列与天然序列完全一致。结论对GM-CSFcDNA5′端进行修饰可有效地提高N末端启始区的翻译效率,从而实现在大肠杆菌中的高效表达。获得具有生物学活性的重组蛋白。
其他文献
改变落后的生产管理方式,采用奖励、激励机制激发乡镇发展茶叶产业,采用补助方式鼓励农户用科学的方式对茶园及茶叶生产进行科学管理。
本文使用高斯过程回归模型进行时间序列分析,研究其预测的准确性和可靠性。有别于一般的时间驱动模型,本文大部分采用自回归模型。不仅考察了单步预测的结果,也实现并分析了
<正> 痿证是针灸临床的常见病之一。它以肢体痿软无力而得名。《素问·生气通天论》中就有“弛长为痿”之说。该证包括现代医学在病程中出现以肢体瘫软萎缩为主证的多种疾病
为探讨城市森林土壤氮肥供应状况及其影响要素,以上海环城绿带森林群落土壤为研究对象,测定了20个样地土壤的脲酶和蛋白酶活性,分析其与土壤pH、土壤含水量、群落木本植物胸
由中材集团成都建筑材料工业设计研究院有限公司(以下简称成都建材院)承担的国家科技支撑计划“电石渣制水泥规模化应用技术及装备研究”课题配套的示范生产线“新疆米东天山2&
2018年,伊通满族自治县农牧局按照省、市、县脱贫攻坚工作会议精神,把精准贯穿到脱贫攻坚全过程,坚持多措并举,根据行业特点稳步推进脱贫攻坚工作,持续推动脱贫攻坚向纵深拓
工业建筑改造型创意园有其独有的文化背景和特色,外部公共空间作为园中交流、交通的载体,提供了展示场所、互动空间、文化传导媒介,塑造了园区的性格特征.文章以福州大学怡山
"卓越工程师教育培养计划"的核心和难点在于学生企业实践教学的实施。本文针对自动化专业"卓越计划"学生企业实践教学过程中出现的问题,从培养方案、教学内容、教学过程、教师指
1 病历简介患者男,39岁,维吾尔族,农民,住院号98692.既往偶有少量饮酒史.1998年5月14日因连续大量饮酒后醉酒,意识不清呈嗜睡状态,在乡医院诊断"急性酒精中毒",予5%葡萄糖盐