随着现代科技的不断进步,DNA技术越来越受到重视。作为能够识别锁定嫌疑人的有力工具,DNA检验技术在刑事案件检验中得到广泛应用在重大疑难案件中发挥了重要作用。陈旧生物样本检验是目前DNA检验技术中需解决的难题,在实际工作中我们发现,陈旧生物样本物证经常出现检验位点检出不全,甚至无法得到有效分型的现象。致使一些重大疑难命案积案使破受到影响陈旧生物样本物证因为生物样本浸润到木质纤维素载体里时问较长,不可避免地受外在条件环境中的光、空气、水分等的影响^[1],现有的生物样本处理和DNA提取方法都对于镶嵌在紧密载体内部的生物样本和木质纤维素载体交联的生物样本处理不足,生物样本无法充分释放,对于保存时间长、蛋白变性程度严重,以及与载体交联严重的生物样本的DNA提取都不理想,有时甚至无法获得有效DNA,因而浪费了宝贵的生物样本和现场检材,影响了案件侦破和关键证据的取得。为了从陈年的含有生物样本的木质纤维素类物证检材中提取出DNA生物样本证据并进行检验,本研究利用高温老化的方法对物证进行老化模拟实验,由于在法医学中,木质纤维素物证检材主要分为纸类和棉布类,所以本研究分别针对两类进行了研究。又因DNA检测所需酸碱条件为碱性,故选取了3种在pH值为9的情况下仍有较高的活性的商品酶,利用酶法,即将纤维素酶^[2]、商品纤维素酶A^[3]和商品纤维素酶B分别针对纸类^[4]木质纤维素物证检材和布类木质纤维素物证检材进行复配,使所需得的生物样本DNA从木质纤维素物证检材被降解形成的纤维松散结构中溶出,成功提取生物样本DNA并利用STR-PCR技术进行检测。经过对选取的三种商品酶的酶活测定与蛋白含量测定,降解纸类木质纤维素物证检材最佳酶复配方案为纤维素酶与碱性商品纤维素酶A蛋白含量比为18.7:17.9,商品纤维素酶B的蛋白含量为3.21 mg/ml,商品纤维素酶B溶解入液体酶后离心取上清后,再与pH值为9的Tris-HCI溶液配置成蛋白浓度为1.66 mg/ml的酶液为最终的针对纸类复配纤维素酶。降解布类木质纤维素物证检材最佳酶复配方案为纤维素酶和碱性商品纤维素酶A蛋白含量比为26.18:10.74,固体商品纤维素酶B蛋白含量为3.21 mg/ml时降解棉布释放还原糖量最多,在此复配方案的基础上,再与pH值为9的Tris-HCI溶液配置成蛋白浓度为1.348mg/ml时,降解棉质物证效果最好。为了检验木质纤维素检材的降解效果,利用扫描电子显微镜,观察检材纤维素的损伤情况。结果显示,扫描电子显微镜显示两种复配酶水解对纸类和布类纤维造成了明显的损伤;有效地解决了陈年含有生物样本的木质纤维素类物证检材物证中所需的生物样本DNA提取这一关键问题;并针对几个陈年案例运用复配酶降解的方法处理后,将所得的生物样本DNA进行STR-PCR分型检验,与未用酶法处理的实验组能够得到效果更好的特征峰,即酶法能有效地降解陈年含有生物样本的木质纤维素类物证检材,从而释放出所需的生物样本DNA以供检验。本研究不仅为陈年积案的侦破提供了强有力的手段,也为法医学的进步发展提供了新的思路和方法。