肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是消化系统常见的恶性肿瘤之一，也是人类高发的恶性肿瘤。从全球来看，它都是一种常见的恶性疾病，其发病率和死亡率高，据有关统计，肝癌的死亡率排恶性肿瘤死因的第3位。非洲和亚洲是肝细胞癌的高发地区，在亚洲尤其是我国更是肝细胞癌的高发地区。我国原发性肝癌在恶性肿瘤死因中位居第2位，由于我国是乙肝大国，他们大部分属于肝细胞癌。近年来，随着医疗技术水平的发展，人们的生活水平和自我意识的提高，临床上早、中期肝细胞癌的诊断和治疗有了很大的提高。从全国来看，尤其是经济发达的地区取得了一定的成绩，但是由于发现时往往已是晚期，给治疗带来了很大的困难，经治疗后，其预后差，生存时间较短。即使早、中期肝细胞癌，虽经治疗，控制其复发、转移也是很重要和需要考虑的问题。因此寻找特异性的肿瘤标志物，以及研究治疗肝细胞癌的潜在治疗靶点显得尤为重要。细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C（cell division cyclin25homolog C，CDC25C）是近年来研究的一个比较热门的蛋白激酶,属于CDC25蛋白激酶家族。它在细胞周期的G2/M期转换中起着重要的调控作用，并且对启动细胞的有丝分裂也有着重要的作用。近年来随着对它的深入研究，发现它在多种肿瘤细胞如肾癌、胃癌、乳腺癌中的表达水平增高。并经随后研究进一步证明，它的过表达可以导致肿瘤的发生，并且发现其高表达水平与肿瘤的恶性程度、是否有远处转移、肿瘤直径大小等有关联。但在肝细胞癌中的表达情况及意义，在国内鲜有报道。紧密连接蛋白Claudin-6（CLDN6）属于Claudins家族的成员，Claudins蛋白是细胞紧密连接的重要组成部分，它能够在上皮细胞之间设置障碍，阻止一些分子之间的流动。此外，它还具有维持细胞之间的粘附性、细胞的极性、细胞膜的通透性以及细胞与细胞之间的运输，同时CLDN6在调节细胞的增殖和分化等方面还有重要作用。研究发现，它的表达的异常与肿瘤的发生、发展有着密切关系。并且它在细胞中表达的高低都可能会影响到细胞的异常，换言之，CLDN6在细胞及组织中表达上调和下调都可能会引起细胞紧密连接结构的完整性的破坏，进而导致肿瘤细胞的发生和发展。那么CLDN6蛋白在肝细胞癌中的表达是上调还是下调呢，我国的文献中报道还比较少，因此研究CLDN6蛋白在肝细胞癌中的表达有着重要而积极的意义。本研究通过应用免疫组织化学的方法，检测正常肝细胞组织、癌旁组织、肝细胞癌组织中的CDC25C蛋白和CLDN6蛋白，并对肝细胞癌标本对应的患者进行随访，观察并统计其预后情况。分析两种蛋白在肝细胞癌组织中的表达情况及临床意义。目的通过检测细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C（CDC25C）和紧密连接蛋白Claudin-6（CLDN6）在人肝细胞癌组织及其对应的癌旁组织和正常肝细胞组织中表达情况，探讨CDC25C和CLDN6两个蛋白在HCC的发生、发展中的作用和意义。材料与方法收集标本：实验标本58例来自于郑州大学第一附属医院肝胆外科在2011年8月--2012年4月期间通过手术切除的HCC患者。患者在手术前，均未经肝动脉化疗栓塞（transcatheter arterial chemoembolization，TACE）、化疗、HIFU（Highintensity focused ultrasound,高强度聚焦超声）、放疗、免疫治疗、生物治疗、射频、氩氦刀等抗癌治疗措施。术后均通过病理证实为肝细胞癌。对所有HCC病例患者通过电话、邮件、复查、上门拜访等方式进行随访。随访截止到2013年6月，同时统计无瘤生存时间，时间以月为单位。在本实验中，将使用中位无瘤生存时间对58例HCC患者进行无瘤生存分析。此外，另取24例肝细胞癌的癌旁组织和18例正常肝脏组织作为实验对照组。采用免疫组织化学染色方法（SABC法）来检测CDC25C蛋白和CLDN6蛋白在58例肝细胞癌组织、24例癌旁组织、18例正常肝脏细胞组织中的表达情况。实验所得数据均采用SPSS17.0统计软件进行处理。其中涉及到的两个率的比较，我们将使用卡方检验；关联性分析将使用Pearson相关检测，而对无瘤生存数据将采用Kaplan-Meier法，同时行log-rank检验。此外还要分析两个蛋白的表达情况与临床病理特征之间的关系。结果1、免疫组织化学结果显示：在所检测的组织中所见到的颜色深浅不一的棕黄色颗粒为CDC25C和CLDN6蛋白质，存在于细胞质和细胞核中。CDC25C在肝细胞癌组织、癌旁组织、正常肝脏组织三个实验组中表达的阳性率分别为86.2%、45.8%和11.1%，表达差异均有统计学意义（P＜0.05），CLDN6在肝细胞癌组织、癌旁组织、正常肝脏组织三个实验组中表达的阳性率分别为77.6%、41.7%和16.7%，表达差异均有统计学意义（P＜0.05）2、统计软件分析数据显示：CDC25C在HCC组织中的表达与乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、肿瘤直径大小和肿瘤分化程度有关（P＜0.05），CLDN6在HCC组织中的表达与肿瘤直径大小有关（P＜0.05）。在HCC实验组中，CDC25C阳性组和阴性组的中位无瘤生存时间各为12个月、15个月，其差异具有统计学意义（P＜0.05）。CLDN6阳性组及CLDN6阴性组中位无瘤生存时间分别为12个月和14个月，差异有统计学意义（P＜0.05）。CDC25C与CLDN6在肝癌中的表达呈正相关（r=0.359，P＜0.05）。结论1. CDC25C和CLDN6两个蛋白在肝细胞癌组织中均表达升高，且CDC25C与CLDN6在肝癌中的表达呈正相关。2. CDC25C在肝细胞癌组织中的表达与乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、肿瘤直径大小和肿瘤分化程度有关，CLDN6在肝细胞癌组织中的表达与肿瘤直径大小有关。CDC25C及CLDN6蛋白对HCC的侵袭性及预后判断有重要意义。肝细胞癌中CDC25C阴性组比CDC25C阴性组的中位无瘤生存时间长。CLDN6阴性组比CLDN6阳性组中位无瘤生存时间长。这说明CDC25C和CLDN6的表达与无瘤生存时间相关。