论文部分内容阅读
S.aureus是生鲜牛奶潜在的食品安全隐患。采集泰安周边地区个体奶户中的未经处理的生鲜牛奶样品,分离鉴定样品中S.aureus,并结合分子分型、毒力基因筛查、醋酸氯己定MIC试验、抗生素药敏试验等试验技术,综合评估生鲜牛奶中S.aureus分子分型、毒力基因分布、醋酸氯己定耐受性和抗生素抗性,以期为乳制品风险评估及质量控制提供指导和借鉴。主要结论如下:1.生鲜牛奶中S.aureus的分离鉴定通过形态学和分子生物学鉴定,从125份生鲜牛奶样品中分离鉴定出S.aureus共51株,检出率达40.8%。并根据mecA基因筛查结果,鉴定其中9株为MRSA。2.生鲜牛奶中S.aureus对抗生素抗性研究采用药敏纸片法测定51株S.aureus对抗生素抗性。其中对红霉素的耐药率达52.9%,对克林霉素、四环素和环丙沙星耐药率达33.3%、37.3%和31.4%,对利福平、庆大霉素、左氧氟沙星、阿米卡星、氨苄西林/舒巴坦耐药率为3.9-19.6%。未发现有对替考拉宁、利奈唑胺和万古霉素耐药的S.aureus。3.生鲜牛奶中S.aureus的spa分型研究51株S.aureus进行spa分型实验,共分为10个型,为t518、t519、t521、t2875、t377、t127、t189、t114、t437、t2460。MSSA中t518、t519和t521数量较多,分别有17株、10株和7株;MRSA中t114数量最多,共有6株。本研究同时检出在人群中定植传播的spa型t114和t437。生鲜牛奶生产、加工及运输中存在的人为污染增加其安全隐患。4.生鲜牛奶中MRSA的SCCmec分型和PFGE分型研究对9株MRSA进行PFGE聚类和SCCmec盒区分。SCCmec分型结果显示,t114与t437为SCCmec III型,t2460为SCCmecIV型。从生鲜牛奶中分离到的MRSA主要为SCCmecIII型。PFGE聚类共分5个PFGE簇,包括一个簇(3株MRSA,3个PFGE型),另一个簇(3株MRSA,2个PFGE型)和3个单菌株PFGE型。生鲜牛奶分离MRSA的PFGE型多样。5.生鲜牛奶中S.aureus的毒力基因分布研究采用PCR技术对51株S.aureus进行毒力基因筛查。携带较多的是肠毒素基因sea(15.7%)、seb(25.5%)和seh(17.6%)。此外,sec、seg、sei、tsst及etb均有一定数量的阳性株检出。6.生鲜牛奶中S.aureus的消毒剂外排泵基因分布和醋酸氯己定MIC研究S.aureus中筛查到1株携带消毒剂外排泵基因qacA/B,其醋酸氯己定MIC为4mg/L。未发现其他消毒剂外排泵基因smr、qacG、qacJ、qacH。MSSA中醋酸氯己定MIC分别是8 mg/L(4株)、4 mg/L(30株)、2 mg/L(5株)和1 mg/L(3株),MRSA中醋酸氯己定MIC分别是8 mg/L(2株)、4 mg/L(5株)、2 mg/L(1株)和0.5 mg/L(1株)。生鲜牛奶中S.aureus的消毒剂外排泵基因检出率较低,醋酸氯己定MIC主要集中在4 mg/L。