论文部分内容阅读
目的：建立大鼠视神经炎模型——实验性变态反应性脑脊髓炎，探讨该模型中雄激素对视神经形态功能和视网膜神经节细胞凋亡的影响。
方法：将雌性Wjstar大鼠随机分为正常组、未用药对照组和雄激素组。未用药对照组每天以安慰剂灌胃，雄激素组每天以0.25 mg/kg甲睾酮灌胃。用药20天后，未用药对照组和雄激素组注射完全弗氏佐剂一豚鼠脊髓匀浆，并辅以注射百日咳疫苗(bordetella pertussis vaccine，BPV)诱导EAE模型。诱导前7天，大鼠上丘和外侧膝状体注射荧光金(nurogold，FG)以逆行标记视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells，RGCs)。继续用药至诱导后14～30天，取正常鼠和出现症状48～72小时内的大鼠，应用光学显微镜和闪光视觉诱发电位(flashVisualevoked potencial，FvEP)观察视神经形态和功能的变化；荧光显微镜下观察视网膜铺片并计数RGCs；原位缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated biotinylated UTP nick end labeling，TUNEL)观察RGCs的凋亡情况。
结果：1．临床表现：诱导后10天开始，EAE大鼠相继出现尾无力、松弛、下垂，麻痹以及后肢无力、麻痹甚至死亡等临床体征，未用药对照组和雄激素组的EAE发病率分别为80.0﹪和37.5﹪；两组的发病潜伏期分别为12.00±2.02和16.00±1.73天，雄激素组的发病潜伏期延长(p<0.05)；两组的EAE症状评分分别为2.83±0.94和1.15±0.40，雄激素组的症状评分降低(p<0.05)。 2.视神经的形态学和功能改变：未用药对照组视神经纤维走行迂曲呈波浪状，弥漫脱髓鞘改变；雄激素组视神经纤维走行较规则，脱髓鞘改变不明显。FVEP结果：与未用药对照组相比，雄激素组的N1、P和N2波潜伏期明显缩短(p<0.05)，N1.P和P-N2振幅提高(p<0.05)。
3.RGCs计数和凋亡：荧光显微镜下计数RGCs：正常组、未用药对照组和雄激素组RGCs计数分别为2284±132/mm<2>， 934±78/mm<2>和1725±95/mm<2>，各组间差异有统计学意义(p<0.05)。nYNEL法观察RGCs的凋亡情况：正常组、未用药对照组和雄激素组每高倍视野(×400)的nYNEL阳性细胞数分别为4.02±O.16个、24.44±2.22个和9.84±2.36个，各组间差异有统计学意义(p<0.05)。
结论：口服雄激素可以降低EAE发病率和症状评分；抑制EAE鼠RGCs的调亡；减轻视神经的炎症反应和脱髓鞘改变，改善视神经的传导功能。