硅胶柱层析分离天然及合成磷脂酰乙醇胺的研究

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高纯度磷脂酰乙醇胺(PE)在提高人体记忆力与增强大脑功能方面优于磷脂酰胆碱(PC),磷脂酰乙醇胺具有维持及改善认知功能,其应用价值极其为重要;PE在天然磷脂组成中含量较低,这使得对其纯化较为困难;在天然磷脂酰乙醇胺的应用过程中,由于脂肪链的不饱和性,使得其化学稳定性、分散性、乳化性等都不好,而通过合成具有饱和脂肪链的磷脂酰乙醇胺,其用途更广、更安全,尤其是在医药和食品工业中。目前国内所用高纯度磷脂产品多从国外进口,年需求量为数吨以上,而传统研究中又以PC居多,忽略了PE的重要性能,所以本实验的主要目的是研究获得高纯度PE的方法,同时对天然磷脂进行改性,提高PE在天然磷脂中的含量,并得到结构稳定的磷脂酰乙醇胺,经柱层析分离后能达到医药和食品等领域应用的纯度要求。本文以天然磷脂PC-60为原料,运用硅胶柱层析法,考察天然磷脂在硅胶柱中的洗脱情况,在最佳工艺条件下,即氯仿/甲醇=2/3(v/v),室温下操作,上样量为0.025g磷脂粗品/g硅胶,流速控制在3ml/min左右,可得到纯度为96.2%,回收率为89.6%的磷脂酰乙醇胺:通过酶转化法使得磷脂酰乙醇胺在天然磷脂中的含量提高到80%左右,对酶转化后合成的磷脂酰乙醇胺进行分离纯化,在最佳洗脱工艺下,得到纯度为98.3%,回收率达90.4%的磷脂酰乙醇胺,能满足高纯度磷脂制备的要求,同时还选用了其它低毒的洗脱剂,也得到了不错的效果。本实验还用硬脂酸与天然磷脂中的不饱和链进行脂肪酰置换反应,经柱分离得到纯度高于95%的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺产品,红外分析表明,没有不饱和键的吸收峰,这丰富了对磷脂酰乙醇胺的研究,为日后磷脂酰乙醇胺的工业化生产提供了可靠的数据支持。
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