猪细小病毒是引起猪繁殖障碍的重要病原之一,该病广泛存在于世界各地并在大多数猪场流行,给养猪业带来巨大的损失,因此猪细小病毒一直是猪病研究的热点之一。VP2蛋白是PPV病毒粒子的主要衣壳蛋白,能刺激机体产生抗PPV中和抗体,且基因序列保守,其表达的蛋白具有较强的免疫原性,故VP2蛋白在猪细小病毒诊断试剂及新型疫苗研究领域具有重要价值。本研究根据GenBank发表的PPV BQ株的基因序列,设计一对引物,通过PCR扩增得到VP2基因片段,长度为1740bp。酶切后插入原核表达载体pET32a(+)的T7启动子下游,构建的重组质粒VP2-pET32a经IPTG诱导,在E.coli Rosetta中进行高效表达。SDS-PAGE结果显示,表达产物分子量为82KDa,与预期大小一致,主要以包涵体的形式存在。Westernblot显示,该蛋白能与感染PPV猪的阳性血清发生特异性反应,说明该重组蛋白具有抗原性,可以作为鉴别诊断用抗原。噬菌体展示技术是一种靶蛋白配体筛选方法。本试验以VP2蛋白为靶分子,利用噬菌体随机十二肽库,对VP2重组蛋白进行了五轮生物淘选。在第四轮筛选表达载体pET32a(+)的标签蛋白,从第五轮洗脱物噬菌斑中随机挑取10个单克隆菌落,进行核酸序列的测定及多肽序列的推导,其结果表明,对靶分子经过5轮筛选后,最终筛选出6种亲和力的十二肽。将亲和力最高和重复性最好的2个序列进行合成,分别为1号肽：HTHQLHFLNHNP;2号肽：HNLHLYHYLRSA。通过MTT法和免疫荧光试验检测合成肽体外抗病毒活性,其结果显示PPV和肽孵育1h后同步加入ST细胞这种方式有抑制病毒的作用,2号肽具有良好的生物学活性,对病毒的抑制率远高于1号肽,1号肽抑制病毒的能力较弱,但二者混合后抑制能力增强。本研究为寻找PPV受体奠定了基础,为今后对PPV的防治及多肽疫苗的研制开发提供了一定的理论基础和试验依据。