阴道菌群失调动物模型的建立及乳杆菌对小鼠阴道菌群调整的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:sunnus31
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目的:细菌性阴道病(Bacterial Vaginosis,BV)是妇产科的常见病和多发病,其感染率在15%~50%。细菌学上主要表现为阴道菌群失调,阴道内乳杆菌数量减少,尤其是产过氧化氢(H2O2)的乳杆菌数量减少,阴道加德氏菌、链球菌、大肠埃希菌和棒状杆菌等需氧菌或厌氧菌过盛生长,在临床上主要表现为无阴道粘膜炎症性综合征。健康妇女的阴道分泌物中含菌量为105~106CFU/ml,而发生BV时多达109~1011CFU/ml。目前BV通常用抗生素进行治疗,虽然抗生素治疗可以使BV的症状得到暂时缓解,却进一步杀死阴道内原已很少的乳杆菌,加重阴道微生态失调的程度,从而使BV反复发作。阴道乳杆菌是人类阴道菌群中最重要的生理性细菌,在抗感染和调整阴道菌群失调等方面发挥着重要作用。恢复BV患者的阴道微生态平衡和正常菌群环境是治愈BV的关键。 阴道菌群失调动物模型是探讨BV的发病机制、临床治疗和新药开发的基础,目前国内尚未见到这方面的报道,国外相关的报道也较少。本实验目的是建立一个小鼠阴道菌群失调模型,为今后对BV深入研究和模型的应用提供实验依据;本实验也考察了乳杆菌DM8909对小鼠阴道菌群失调的调整及在健康小鼠阴道应用的安全性。 方法: 1.阴道菌群失调小鼠模型的建立。分别设正常对照组、处理Ⅰ组(即在小鼠阴道内先注入阿莫西林,然后再接种大肠埃希菌)及处理Ⅱ组(即单纯在小鼠阴道内接种大肠埃希菌),通过对大肠埃希菌在小鼠阴道内定植情况进行动态考察和分析,比较两种处理方法建立起来的小鼠阴道菌群失调模型的稳定性和可靠性。 2.乳杆菌DM8909对小鼠阴道菌群失调的调整作用。采用上述处理Ⅰ组建立的小鼠阴道菌群失调模型,将模型鼠分为治疗组(即在小鼠阴道内接种乳杆菌DM8909)和非治疗组(即在小鼠阴道内接种PBS液),分析和考察阴道菌群变化,并对小鼠阴道损伤程度进行评价。 3.乳杆菌DM8909阴道应用的安全性。采用不同浓度的乳杆菌菌液(lo6eFu/ml、loseFU/m一、logeFu/ml)对正常小鼠阴道进行接种,分析和考察乳杆菌对小鼠阴道菌群的影响以及对小鼠阴道损伤程度的评价。 结果: 1.阴道菌群失调小鼠模型的建立。建立模型后连续7天对阴道内大肠埃希菌动态变化进行测定和考察,结果显示:处理I组小鼠阴道内大肠埃希菌定植数量明显多于正常对照组(P<。.01),其变化幅度在1个数量级以内,而处理H组变化幅度在3个数量级以上。病理涂片显示:处理I组阴道粘膜破坏严重,阴道上皮细胞明显减少、白细胞明显增多,说明处理I组所建立的阴道菌群失调小鼠模型是成功和可靠的。 2.乳杆菌DM8909对小鼠阴道菌群失调的调整作用。乳杆菌治疗组对于去除定植在小鼠阴道内的大肠埃希菌效果显著优于非治疗组(P<0.05),与正常对照组相比,没有明显差异口>0.05)。病理学观察,可见乳杆菌治疗组白细胞减少,以阴道上皮细胞为主;而非治疗组白细胞仍大量存在,这同时也证实了本实验所建立的阴道菌群失调小鼠模型是成功的、可恢复的。 3.乳杆菌DM89og阴道应用的安全性。不同浓度的乳杆菌DM8909菌液可呈剂量依赖地提高正常小鼠阴道内的乳杆菌含量,而对阴道内其他菌群均无显著影响(P>0.05),且未造成阴道粘膜的明显破坏。 结论: 1.经阿莫西林溶液处理,造成小鼠阴道菌群改变,在此基础上阴道接种致病性大肠埃希菌,可以建立起稳定的小鼠阴道菌群失调模型。 2.乳杆菌DM89og制剂能够去除大肠埃希菌在模型鼠阴道内的定植,对模型鼠阴道菌群失调具有一定的调整作用。 3.乳杆菌DM89Og对小鼠阴道菌群没有明显的破坏作用,对阴道粘膜没有明显的刺激作用,阴道应用是安全的。
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