CD4+CD25+T细胞由小鼠的胸腺产生，小鼠出生3天开始从胸腺转移到外周，构成CD4+T细胞的5-10％，在正常情况下发挥调节功能，防止小鼠发生器官特异性自身免疫性疾病，称为CD4+CD25+天然调节性T(Treg)细胞。出生3天切除胸腺可以导致小鼠的多器官自身免疫性疾病，同种异体胸腺移植或回输CD4+CD25+T细胞可以防治小鼠模型自身免疫性疾病。人类具有调节功能的CD4+T细胞集中在CD25high细胞亚群，它们与小鼠的CD4+CD25+T细胞同样具有FOXP3和CD25的表达，出生时即从胸腺转移到外周，占外周血CD4+T细胞的1-2％，CD4+CD25highT细胞因能够抑制效应性T细胞增殖和细胞因子的分泌而被认定为人类调节性T(Treg)细胞。近期的研究发现CD4+CD25highTreg细胞在一些人类自身免疫性疾病发病中有数量减少或功能降低的变化。Vogt-小柳原田(VKH)综合征在临床上以双眼反复发作的肉芽肿性全葡萄膜炎、中枢神经系统、听觉器官和皮肤受损表现为特征，是含有色素成分的器官受损的器官特异性自身免疫性疾病，但其确切的发病机制尚不完全清楚。本研究旨在研究CD4+CD25high Treg细胞在VKH发病中数量和功能的变化，探讨它们在VKH综合征发病中的作用。 目的： 检测VKH综合征患者外周血CD4+CD25highTreg细胞比例变化。 方法： 抽取活动期VKH综合征患者(12人)、静止期VKH综合征患者(10人)和健康人(14人)外周静脉血。分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)。用流式细胞术检测外周血CD4+CD25highTreg细胞比例。 结果： 活动期VKH综合征患者外周血CD4+CD25highTreg细胞比例(1.19±0.38％)显著低于健康对照组(1.91±0.51％，p=0.002)和静止期VKH综合征患者(1.82±0.41％，P=0.010)。活动期患者CD4+CD25high Treg细胞亚群CD25分子(IL-2受体α链)的表达显著低于健康人和静止期患者(p=0.013，p=0.038)。活动期VKH患者外周血CD4+CD25+T细胞的比例(14.37±3.22％)与健康对照组(12.67±2.06％，p=0.351)和静止期VKH综合征患者(11.73±2.21％，p=0.101)无显著差异。 结论： 活动期VKH综合征患者CD4+CD25highTreg细胞比例显著下调，CD25在单细胞水平表达下调，结果表明显著下调的CD4+CD25highTreg细胞的比例和CD25分子的表达与VKH综合征患者活动性葡萄膜炎临床表现相关。 目的： 检测VKH综合征患者外周血CD4+CD25highTreg细胞功能分子表达变化。 方法： 抽取活动期VKH综合征患者(12人)、静止期患者(10人)和健康人(14人)外周静脉血，分离外周血PBMCs，用细胞破膜技术和四色流式细胞术检测外周血CD4+CD25highTreg细胞中GITR+、CD45RO+、CD69+、FOXP3+和CTLA-4+细胞的比例。 结果： 健康人和VKH综合征患者绝大多数的CD4+CD25high Treg细胞FOXP3的表达(82％～95％)显著高于CD4+CD25low和CD4+CD25T细胞亚群。活动期VKH综合征患者CD4+CD25highTreg细胞中FOXP3+细胞的比例(88.71±4.43％)显著低于健康对照组(95.34±2.21％，P=0.001)和静止期患者(93.28±2.61％，P=0.023)。VKH综合征患者和健康对照组CD4+CD25highTreg细胞表达的CD45RO(～80％)，CTLA-4(～50％)和GITR(～30％)在VKH患者与健康对照组无显著性差异。健康人和VKH患者的CD4+CD25highTreg细胞几乎不表达CD69(～1％)。 结论： 健康对照组和VKH患者的CD4+CD25highTreg细胞具有相似的天然调节性T细胞的表型特征。活动期患者CD4+CD25highTreg细胞中FOXP3+细胞比例显著减少，FOXP3表达的下调与VKH综合征患者葡萄膜炎活动性密切相关。 目的： 检测VKH综合征患者外周血CD4+CD25highTreg细胞对CD4+CD25-T细胞体外增殖的抑制功能。 方法： 抽取活动期VKH综合征患者(20人)，健康人(20人)和静止期患者(10人)外周血。采用免疫磁珠细胞分离法(MACS)分选出CD4+CD25highTreg细胞、CD4+CD25-T细胞和CD3-PBMCs。CD3-PBMCs经丝裂霉素处理后作为抗原递呈细胞(APCs)。CD4+CD25-T细胞在自体APCs存在的条件下以不同比例与自体CD4+CD25highTreg细胞共同培养；在可溶性0.01ug／ml或板包被的5ug／mlanti-CD3存在或不存在下，健康人或活动期患者的CD4+CD25-T细胞在自体APCs存在的条件下以1：1比例与活动期患者或健康人的CD4+CD25highTreg细胞交叉培养；细胞在培养的最后16小时加入1 uCi／孔[3H]，至6天收获细胞，采用液体闪烁计数仪检测细胞增殖。结果： 活动期VKH综合征患者CD4+CD25highTreg细胞对CD4+CD25-T细胞同种抗原特异性抑制功能(35.9％)显著低于健康人(70.8％，p<0.001)和静止期患者(64.3％，p=0.001)，降低至少8倍。VKH综合征患者和健康人CD4+CD25high Treg细胞在多克隆刺激下无明显增殖。活动期患者CD4+CD25high Treg细胞对同种异基因CD4+CD25-T细胞增殖抑制功能显著低于健康人(p=0.003；p=0.019)。在多克隆刺激下，活动期患者CD4+CD25high Treg细胞对自体CD4+CD25-T细胞增殖抑制功能显著低于健康人(p=0.003，p=0.007)和静止期患者(p=0.003，p=0.004)。 结论： VKH综合征患者和健康人CD4+CD25highTreg细胞均具有无能和抑制特征。活动期VKH综合征患者CD4+CD25highTreg细胞的增殖抑制功能显著下调可能与VKH综合征的活动性葡萄膜炎发病相关。 目的： 检测VKH综合征患者外周血CD4+CD25highTreg细胞对CD4+CD25T细胞产生细胞因子的抑制功能。 方法： 抽取活动期VKH综合征患者(18人)，健康人(18人)和静止期患者(12人)外周血。CD4+CD25highTreg细胞、CD4+CD25T细胞和CD3-PBMCs的分选和处理如前所述。在板包被的5ug／ml anti-CD3活化条件下，健康人或活动期患者CD4+CD25-T细胞在自体APCs存在的条件下分别以1：1比例与活动期患者或健康人的CD4+CD25highTreg细胞共同培养。在培养6天时，移取上清100u1，用ELISA方法检测上清中IFN-g,IL-13和IL-17水平。结果： 活动期VKH综合征患者CD4+CD25-T细胞培养上清中IFN-g的水平(1928.5±232.3pg／ml)显著高于健康人(1130.8±220.4pg／ml，p<0.001)和静止期患者(1234.3±239.5pg／ml，p=0.001)。活动期患者CD4+CD25-T细胞与CD4+CD25highTreg细胞共同培养上清中IFN-g的水平(1261.3±200.9pg／ml)显著高于健康人(349.0±66.6pg／ml，p<0.001)和静止期患者(412.4±98.8pg／ml，p<0.001)。活动期患者CD4+CD25T细胞培养上清中IL-13的水平与健康人和静止期患者无显著差异。活动期患者效应性T细胞与调节性T细胞共同培养上清中IL-13的水平(172.78±35.2pg／ml)显著高于健康人(109.72±25.7pg／ml，p=0.018)和静止期患者(116.5±30.7pg／ml，p=0.044)。活动期患者CD4+CD25-T细胞培养上清中IL-17的水平(38.9±7.35pg／ml)显著高于健康人(23.5±5.61pg／ml，p=0.008)和静止期患者(21.7±4.92pg／ml，p=0.003)，VKH患者和健康对照组CD4+CD25highTreg细胞对CD4+CD25-T细胞IL-17的产生无显著抑制和促进作用。 结论： 活动期VKH综合征患者CD4+CD25highTreg细胞对上调的IFN-g的抑制功能显著降低，而对上调的IL-17无显著抑制或促进作用。 全文总结： 本研究中CD4+CD25highTreg细胞比例和抑制功能在活动期VKH综合征患者显著下调的结果表明CD4+CD25highTreg细胞在数量上和质量上的损害可能与VKH综合征葡萄膜炎的发病有关。