【摘 要】
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目的:探究上调肝癌细胞株HepG2中XPD基因的表达后对肿瘤细胞增殖凋亡、迁移以及自噬水平变化的影响。方法:采用脂质体作为载体介质将重组质粒pEGFP-N2/XPD和空载质粒pEGFP-N2
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目的:探究上调肝癌细胞株HepG2中XPD基因的表达后对肿瘤细胞增殖凋亡、迁移以及自噬水平变化的影响。方法:采用脂质体作为载体介质将重组质粒pEGFP-N2/XPD和空载质粒pEGFP-N2瞬时转染入人肝癌细胞株HepG2细胞内,实验分为四组1)空白对照组、2)脂质体组、3)pEGFP-N2组、4)pEGFP-N2/XPD组,使用荧光显微镜观察绿色荧光表达情况;MTT法观察肿瘤细胞的增殖能力;流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况;体外平板克隆形成实验观察肿瘤细胞体外克隆集落形成情况;划痕愈合实验及Transwell实验检测肿瘤细胞迁移能力的变化。Western blotting检测HepG2细胞XPD及自噬相关蛋白LC3、P62表达量的变化。结果:荧光显微镜观察转染空载质粒pEGFP-N2和重组质粒pEGFPN2/XPD的细胞可见绿色荧光,转染有效。上调XPD的表达后,结果显示与对照组比较,实验组细胞增殖能力减弱(p<0.01),细胞凋亡率增加(p<0.01),体外克隆形成数量减少(p<0.01),迁移能力减弱(p<0.05),并且上调LC3蛋白表达(p<0.01),而随之P62的表达水平减少(p<0.01)。结论:过表达XPD基因能显著抑制肝癌细胞增殖促进其凋亡,抑制体外克隆形成,并且降低肿瘤细胞的迁移能力,同时调控肝癌细胞自噬水平的活化。
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