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马来良姜(Alpiniamutica Roxb.)是姜科(Zingiberaceae)山姜属(Alpinia)多年生草本植物,其花柱可表现出典型的花柱卷曲性(Flexistyly),而对花柱卷曲性进行深入研究将对理解雌雄异熟机制的起源和繁殖系统的演化具有重要的科学意义。目前已通过解剖、生理试验、遗传学试验、生物信息学分析等方法对马来良姜花柱卷曲性展开了全面的研究,但其发育调控的分子机制还不清楚。为了验证调控花柱卷曲性性状的基因调控机制,需要构建转基因植物体系,而转基因体系的建立是基于植物组织培养技术建立植株快速繁殖体系。因此本研究以马来良姜为试验材料,使用植物组织培养技术,以不同外植体、消毒剂的使用、植物生长调节剂的种类和配比等方面为切入点,对构建马来良姜的快繁体系进行了研究,主要研究结果如下:1.马来良姜无菌体系的建立:筛选得到适宜马来良姜实生苗移栽的土壤基质;筛选获得马来良姜种子、块茎芽、根段最适无菌体系构建组合。结果表明:消毒剂的浓度与消毒时长是决定消毒效果的重要因素,NaClO和HgCl2的浓度升高及消毒时间的增加,可降低污染程度也会增加褐化程度;NaClO浓度升高及消毒时间的增加,可促进种子发芽;酒精与NaClO组合处理可得到较好的种子消毒效果,但不能得到较好的块茎芽消毒效果;酒精与HgCl2组合处理是消毒块茎芽和根段的有效方法;在HgCl2处理前后分别进行一次酒精处理可得到更好的块状茎消毒效果。2.马来良姜丛生芽的快速繁殖培养:以马来良姜无菌苗茎基部为外植体,筛选得到马来良姜最适丛生芽增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+ 0.5 mg/LNAA+ 30g/L蔗糖,最佳增殖丛生芽个数为2.96(70 d)。适宜的植物生长调节剂的种类及配比是影响丛生芽增殖的重要因素,将6-BA和NAA组合使用可促进马来良姜丛生芽的增殖;6-BA与IBA组合使用无丛生芽增殖效果可促进幼苗生根。3.马来良姜根段的愈伤组织诱导培养:以马来良姜根段为外植体,筛选得到马来良姜根段愈伤组织的最适培养基为MS+0.25～0.75 mg/L 6-BA+ 1.0 mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖及MS+1.0 mg/L 6-BA+0.25～0.75 mg/L 2,4-D+ 30g/L蔗糖;适宜的植物生长调节剂的种类和配比是诱导愈伤组织的重要因素,单一使用6-BA或NAA的外植体逐渐褐化死亡,组合使用6-BA与NAA可分化出不定根也会使外植体褐化死亡,组合使用6-BA与2,4-D及组合使6-BA、NAA和2,4-D三者可诱导出外植体不同形态的愈伤组织。4.马来良姜茎段的愈伤组织诱导培养:以马来良姜茎段为外植体,筛选得到诱导马来良姜茎段愈伤组织的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+ 0.5～2.0 mg/L 2,4-D+ 30g/L蔗糖;适宜的植物生长调节剂的配比是诱导愈伤组织的重要因素,6-BA与2,4-D组合可诱导出外植体不同形态的愈伤组织也会使外植体褐化死亡。本研究对马来良姜快繁体系构建进行探究,获得了马来良姜种子、块茎芽、根段的最适消毒方式,筛选出了诱导丛生芽增殖最佳培养基及诱导根段和茎段愈伤组织的最佳培养基,填补了马来良姜组织培养研究的空白,为建立马来良姜遗传转化体系,以通过转基因手段研究验证花柱卷曲性的分子机制,进行了技术探讨,并为实现生产马来良姜脱毒苗和植株规模化栽培奠定了基础,亦为提取马来良姜有效药用成分、生产次生代谢产物等开发利用研究创造了初步条件。