目的本实验的目的是试图通过在低氧状态下观察280nm LED-紫外线（Light Emitting Diode-Ultraviolet,LED-UV）对人神经母细胞瘤细胞株（SH-SY5Y细胞株）的形态变化、增殖情况、细胞凋亡及Bcl-2基因的表达的影响,进一步探讨其发生机制,探索低毒、高效的体外净化方法,以期为体外净化提供理论依据。方法1.本实验以对数生长期的人神经母细胞瘤细胞株（SH-SY5Y细胞株）为研究对象,以280nm LED-UV为光源,用终浓度为150μmol/L的氯化钴（C_OCl₂）创建化学低氧细胞培养体系。2.将SH-SY5Y细胞随机分为对照组和实验组（对照组A,实验组B、C、D三组）:对照组A为未处理的细胞;实验组B为低氧组（用终浓度为150μmol/L的C_OCl₂处理后的细胞）;实验组C为紫外线组（用剂量为30J/m²的280nm LED-UV照射后的细胞）;实验组D为低氧+紫外线组（在用终浓度为150μmol/L的C_OCl₂处理的基础上,加用剂量为30J/m²的280nm LED-UV照射后的细胞）。3.将各组细胞加入等量含10%胎牛血清的DMEM/F-12培养基中,置于37℃、5%CO₂、饱和湿度的恒温培养箱中培养48h。4.用倒置显微镜观察SH-SY5Y细胞的形态变化、增殖情况,用CCK-8检测SH-SY5Y细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,荧光定量PCR检测Bcl-2基因的表达。结果1.SH-SY5Y细胞形态、密度变化:培养48h后,在倒置显微镜下观察细胞形态、计算细胞密度。对照组A细胞密度大,为（21.10±1.41）×10⁴/ml,贴壁生长、排列整齐、形态完整,突起明显,胞浆丰富,细胞核大。与对照组A比较,实验组B-D细胞密度均明显减小（P均<0.01）,分别为（17.43±1.17）×10⁴/ml、（6.83±0.76）×10⁴/ml、（2.33±0.85）×10⁴/ml,排列紊乱,部分细胞漂浮,突起回缩或断裂,胞体固缩,呈圆点状,网络消失,各组间的比较差异均有统计学意义（F=199.53,P均<0.01）。实验组C、D均较B细胞密度减小,贴壁细胞减少,漂浮细胞增多,以实验组D最为显著,各实验组间的比较差异均有统计学意义（P均<0.05）。2.SH-SY5Y细胞增殖抑制率:与对照组比较,实验组B-D组的增殖抑制率均明显升高（P均<0.01）,分别为（16.93±1.19）%、（67.93±7.35）%、（89.69±2.32）%,各组间的比较差异均有统计学意义（F=206.35,P均<0.01）。实验组C、D增殖抑制率明显高于实验组B,以实验组D最为显著,各实验组间的比较差异均有统计学意义（P均<0.05）。3.SH-SY5Y细胞凋亡率:对照组A细胞凋亡率为（4.41±0.31）%,与对照组比较,实验组B-D的细胞凋亡率均明显升高（P均<0.01）,分别为（9.10±0.32）%、（22.93±0.33）%、（25.33±0.55）%,各组间的比较差异均有统计学意义（F=2071.78,P均<0.01）。实验组C、D凋亡率明显高于实验组B,实验组D最为显著,各实验组间的比较差异均有统计学意义（P均<0.05）。4.SH-SY5Y细胞Bcl-2基因表达:与对照组比较,实验组B-D的Bcl-2表达量均明显降低（P均<0.01）,分别为（0.7073±0.0176）、（0.3987±0.0070）、（0.2137±0.0037）,各组间的比较差异有统计学意义（F=1504.84,P均<0.01）。实验组C、D的Bcl-2基因表达量低于实验组B,实验组D最为显著,各实验组间的比较差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论1.低氧、280nm LED-UV均能抑制SH-SY5Y细胞增殖、促进其凋亡,且280nm LED-UV对其增殖的抑制及促凋亡作用较低氧强,在低氧条件下的280nm LED-UV对SH-SY5Y细胞增殖的抑制作用及促凋亡效果最显著。提示低氧、紫外线是通过促进SH-SY5Y细胞凋亡来抑制细胞增殖。2.低氧、280nm LED-UV均能下调SH-SY5Y细胞Bcl-2基因的表达,280nm LED-UV下调Bcl-2基因表达的作用比低氧强,在低氧条件下的280nm LED-UV对Bcl-2基因表达的下调作用最显著。提示Bcl-2基因表达减少可能是低氧条件下280nm LED-UV照射诱导SH-SY5Y细胞凋亡的机制之一。