JMJD3及EZH2在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

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目的喉癌在头颈部恶性肿瘤中发病率较高,其治疗注重生存率及功能保存并重的治疗方式,尽管治疗方式不断进展,但目前喉癌的生存率仍然难以得到提升。JMJD3及EZH2参与组蛋白甲基化调节,是表观遗传学调控的一种,广泛参与机体各阶段生长发育,同时其错误表达能导致异常的细胞增殖、迁移等多种生物学过程。本研究从蛋白和基因水平探讨JMJD3及EZH2在喉鳞状细胞癌中的表达及其与临床特征的关联。期望为以后喉癌的诊疗提供新的思路与方法。方法免疫组织化学SP法:以青岛大学附属医院就诊的45例喉鳞状细胞癌患者为研究对象,收集符合标准患者的喉鳞状细胞癌组织切片、癌旁组织切片及相关临床特征数据,采用免疫组化染色法检测研究标本,由2名病理科医师进行双盲阅片。采用c2检验或Fisher确切概率法分析数据的关联性。采用Kaplan–Meier法分析JMJD3及EZH2与喉鳞状细胞癌患者3年总生存率的关联。实时荧光定量PCR法(RT q PCR):对在青岛大学附属医院初次手术治疗的39例喉鳞状细胞癌患者进行研究,收集手术后的喉癌病变组织及癌旁组织标本,通过RT q PCR技术研究,采用Mann-Whitney U秩和检验或Kruskal-Wallis检验探究JMJD3m RNA及EZH2m RNA与喉癌的关联。采用Spearman等级分析JMJD3与EZH2的相关性。结果1.免疫组化结果:在喉癌中JMJD3及EZH2的蛋白表达显著高于癌旁组织(c2分别为9.800、10.766,P值均<0.01)。在高、中、低分化喉癌中,JMJD3阳性表达率分别为35.7%、60%、85.7%,统计学分析示P=0.039<0.05。EZH2阳性表达率分别为35.7%、80%、85.7%,统计学分析示P=0.011<0.05。在淋巴结有转移及无转移中,JMJD3阳性表达率分别为68.4%、34.6%,统计学分析示P=0.025<0.05,EZH2阳性表达率分别为73.7%、38.5%,统计学分析示P=0.019<0.05。在早期与晚期中,JMJD3阳性表达率分别为31.8%、65.2%,统计学分析示P=0.025<0.05,EZH2阳性表达率分别为31.8%、73.9%,统计学分析示P=0.005<0.05。JMJD3及EZH2与喉癌患者年龄及肿瘤部位无关联(P>0.05)。在喉癌3年总生存率分析中,JMJD3及EZH2阳性表达患者显示出更差的生存率,但无统计学意义(P>0.05)。JMJD3和EZH2在喉癌中的表达呈显著的正相关(P<0.01)。2.RT q PCR结果:在喉癌中JMJD3m RNA及EZH2m RNA相对表达量明显高于癌旁组织(Z值分别为2.228、2.419,P值分别为0.026、0.016均<0.05)。与两者蛋白在喉癌中表达趋势相似,JMJD3及EZH2m RNA相对表达量在低分化喉癌、晚期病例、有淋巴结转移患者中高表达(P<0.05),而在年龄及肿瘤部位分组中无差异性表达(P>0.05)。等级分析显示,JMJD3m RNA与EZH2m RNA的表达量呈显著正相关(r=0.867,P=0.000<0.05)。结论1.JMJD3和EZH2的蛋白及m RNA水平在喉鳞状细胞癌中均比癌旁组织表达升高,提示在喉癌的发生发展中两者可能都起着促癌基因的作用。2.JMJD3及EZH2的表达随着肿瘤分化降低而升高,在晚期喉癌及有淋巴结转移病例中均出现高表达,提示JMJD3及EZH2与喉癌的发展、转移及恶性程度相关。3.JMJD3及EZH2均在喉癌中高表达,且呈显著正相关,进一步的病因机制及相关分子抑制剂的研究对判断肿瘤预后及研发新的治疗药物有重要的意义。
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