胶质母细胞瘤是中枢神经系统的恶性肿瘤,其在正常人群中的发病率为0.002%,患者的生存率很低,诊断后10年生存率仅2.8%。目前的治疗方法主要包括手术、化疗、放疗。由于血脑屏障及血脑肿瘤屏障的存在,从而限制了大部分化疗药物到达肿瘤部位发挥作用,因此药物治疗难以达到理想的治疗效果,且由于大部分药物的毒副作用及全身分布,进一步限制了化疗药物的临床疗效。近年来,纳米等药物载体的应用,提供了化疗药物临床应用的前景。其中病毒样颗粒（virus like particles,VLPs）由于其结构稳定性好、吸收效率高、生物相容性好等优点在生物医学领域得到了广泛的关注。迄今为止,大多数研究都将其应用于疫苗领域,只有少数人尝试将其应用于肿瘤的化疗。VLPs属于纳米结构,具有封装或附着蛋白质、核酸或其他小分子的能力,同时,可以通过修饰及附着各种靶向载体,使它们可以特异性地靶向到细胞、组织或器官,从而增加了药物的特异性,并减少全身毒副作用。本课题采用基因工程手段对乙肝病毒核心蛋白病毒样颗粒进行靶向基团修饰,得到具有肿瘤靶向性的RGD-HBc VLPs和具有脑靶向性的TGN-HBc VLPs,通过两种病毒样颗粒的杂合重组使纳米载体具有双重靶向性,更好地到达肿瘤部位。本文主要做了以下几部分工作:首先,对拟使用的病毒样颗粒的相关质粒导入大肠杆菌原核系统进行表达与纯化。经过对大肠杆菌的扩大培养及诱导表达,1.5L菌液可以得到含量高达20-30 mg的病毒样颗粒,且经过初步提纯与后期纯化后,蛋白的纯度较高。通过对病毒样颗粒进行TEM和DLS粒径表征可以看出该VLPs形貌完整,大小均一。测得TGN VLPs粒径大小为28.61 nm,RGD VLPs粒径大小为26.69 nm。其次,构建了分别包载两种化疗药物（阿霉素和替莫唑胺）的纳米药物体系,并对VLPs载药前后的形貌变化和粒径大小进行了表征,DOX@TGN/RGD VLPs粒径大小为29.33 nm;TMZ@TGN/RGD VLPs粒径大小为27.37 nm。载药前后VLPs结构较稳定,形貌和粒径几乎没有变化。DOX@TGN/RGD VLPs和TMZ@TGN/RGD VLPs包载DOX和TMZ的载药量分别为28.87%和1.72%。再次,对成功构建的纳米药物体系进行了体外抗肿瘤研究。在空白VLPs为50-500 mg/mL的浓度范围内细胞活力均在85%以上,可以证明该VLPs作为药物载体具有较好的生物相容性。而载药VLPs的MTT结果显示,协同给药组DOX@TGN/RGD VLPs+TMZ@TGN/RGD VLPs 组与单独给药组DOX@TGN/RGD VLPs组的抗细胞生存活力能力均好于游离DOX组,且当DOX的浓度为0.001-0.1 μg/mL范围内时,协同给药组相比较单独给药组抑制肿瘤生存活力效果更加显著,证明纳米药物体系的抗肿瘤细胞生存活力能力比游离药物更好且联合用药有更好的抑制肿瘤细胞生存活力的能力。之后的激光共聚焦实验结果显示,纳米载体能够在1 h时开始被细胞摄取,在6h时大部分载体都已进入细胞质中。最后,进行了纳米药物体系的体内抗肿瘤性能研究。在成功构建裸鼠原位脑胶质瘤模型后,研究了由Cy5.5标记的空白TGN/RGD VLPs的靶向性,验证双靶向载体对脑肿瘤有着较强的靶向能力;抗肿瘤实验显示在给药10天后,靶向给药组DOX@TGN/RGD VLPs+TMZ@TGN/RGD VLPs组的肿瘤生长抑制率可达91.65%,治疗效果显著优于其他组别。