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研究背景:急性ST段抬高型心肌梗死（ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI）仍然是全球范围内的主要死亡原因,即使在再灌注治疗的时代也是如此。大多数STEMI事件可归因于斑块破裂、斑块侵蚀或钙化结节,它们是不同形态的AS病变。STEMI后心肌坏死将伴随大量固有免疫细胞,如单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞等的快速聚集。这些细胞是炎症反应的关键介质,在AS炎症和心肌梗死后的心肌重塑中发挥重要作用。固有淋巴细胞（innate lymphoid cells,ILC）是新发现的淋巴谱系成员,已证明是固有免疫的重要组成部分。ILC具有淋巴细胞形态,但缺乏抗原特定受体重排,是不具有T、B细胞抗原受体或其他免疫细胞表面标志分子的免疫细胞。根据杀伤功能的强弱,ILC分为“细胞毒性”ILC（NK细胞）和“辅助性”ILC。“辅助性”ILC的特征是CD127的表达,“辅助性”ILC可分为ILC1、ILC2和ILC3。根据分泌的细胞因子和关键转录因子的表达差异,ILC可分为三个亚组,第1组ILC包括NK细胞和ILC1,两者功能相似,ILC1的分化和功能效应的发挥依赖于T-box转录因子T-bet,缺乏CD117的表达;在IL-12和IL-18的刺激下,它们分泌Th1相关的细胞因子IFN-γ和TNF-α。第2组ILC即ILC2,是可分泌IL5和IL13等Th2相关细胞因子的亚型,其分化和功能的发挥依赖转录因子GATA3和RORα,TSLP、IL-25和IL-33的刺激下会分泌Th2相关细胞因子,ILC2的发育需要IL-7的存在。第3组ILC包括ILC3和LTi细胞,其分化和功能的发挥依赖转录因子RORγt,并分泌IL-17和/或IL-22。ILC在各种急性和慢性炎症中发挥重要生理作用。已有研究提出了ILC在小鼠AS模型中的作用。在小鼠模型中,缺乏T-bet、IFN-γ和IL-12的小鼠显示斑块负荷减少,过继转移ILC1可加速AS。高脂喂养小鼠可改变ILC2的数量及其分泌的细胞因子。将ILC2敲除小鼠的骨髓移植到Ldlr-/-小鼠体内,被证明可加速AS的发展。然而,目前ILC在AS中的研究多集中在基础动物研究领域,在STEMI中的具体作用尚不清楚。研究目的:本研究旨在探究STEMI患者外周血中ILC的分布及动态变化,并探讨它们在STEMI中的临床意义和可能发生的功能变化,试图为心肌梗死的治疗提供新的潜在的干预靶点和思路。研究方法:本实验连续纳入了就诊于吉林大学第一医院发病12小时内接受急诊血运重建治疗的新发STEMI患者176例,且入选同时期就诊于吉林大学第一医院接受冠状动脉造影后排除冠心病的患者52例作为对照组,收集研究对象的临床特征,获得外周血液样本进行检测。应用流式细胞术明确STEMI患者外周血PBMC中ILC的分布特征及动态变化;应用RNA-Seq对人类ILC1的差异表达基因（DEGs）进行生物信息学分析,对差异基因的表达进行RT-q PCR验证;应用流式细胞术验证免疫细胞相关基因的表达情况;用Elisa法检测相关细胞因子的分泌水平。此外,对患者进行了长达23个月的随访,应用统计学方法分析ILC与临床结局的关系。研究结果:（1）FACS分析显示,在STEMI急性期,外周血中总ILC和ILC1的数量和百分比明显高于对照组,而ILC2占总ILC的百分比明显降低。STEMI发病3天后,ILC1亚型百分比下降,但仍高于对照组。Pearson相关分析显示ILC1的增加与单核细胞的增加和NK细胞的减少相关。（2）线性回归分析发现STEMI患者ILC1的百分比与肌钙蛋白峰值和HsCRP水平相关。（3）在多变量Cox回归分析中,与第1三分位数组相比,ILC1的第3三分位数组与更高的MACE发生率相关（危险比:2.26;95%置信区间1.56-3.27;P=0.014）。（4）ILC1的RNA测序（RNA Seq）显示,STEMI组与对照组相比,共发现4204个DEGs上调,4712个DEGs下调,其中有302例DEGs与心血管疾病有关,去除BGI异常基因后,222个基因与心血管疾病相关。进一步分析,89个基因显示≥2 Log fold change（Log2 ratio）和48个基因显示＜-2 Log fold change（Log2 ratio）。上调基因的数量远远超过下调基因的数量。此外,还考虑样本FPKM值的变化,最后,发现其中有17个下调和36个上调的基因具有心血管相关功能,与流体剪切应力、AS、血小板活化、心肌收缩等功能相关。（5）RT-q PCR验证ILC1上IFN-γ、TNF-α、VCAM1和MMP9的表达情况,STEMI组显著高于对照组,与RNA-Seq结果一致。（6）流式细胞术验证ILC1上VCAM1和MMP9的表达情况,STEMI组显著高于对照组,与RNA-Seq结果一致。（7）STEMI患者,ILC1的活性细胞因子IL-12、IL-18和分泌的细胞因子IFN-γ、TNF-α水平明显升高。研究结论:（1）总ILC和ILC1数量在STEMI急性期增加,总ILC的增加主要是由ILC1的增加驱动的。（2）STEMI组患者急性期外周血中ILC1的百分比显著升高,ILC1的百分比升高与MACE发生率正相关,多变量Cox回归分析结果显示ILC1百分比是MACE的独立预测因子。（3）ILC1的富集KEGG分析中,抗原加工递呈通路和凋亡通路基因显著富集,但Th1和Th2细胞分化不明显,与ILC属于固有免疫细胞,能对刺激迅速做出反应相关。（4）ILC1上MMP9、TNF-α、IFN-γ和VCAM1基因表达明显上调,血清中的ILC1的活性细胞因子IL-12、IL-18和分泌的细胞因子IFN-γ和TNF-α明显升高,提示ILC1在急性心梗时有扩增,而且伴随基因水平及蛋白水平的功能改变,因此ILC1在STEMI中可能发挥着重要的生理及病理作用,ILC1的作用及其机制研究可能为急性心肌梗死治疗提供新的干预靶点和思路。