对荞麦球蛋白进行酶解,以酶解液对O₂^-的清除率和水解度（DH%）为指标,筛选出适合酶解荞麦球蛋白的蛋白酶,进一步研究蛋白酶的加酶量、底物浓度、温度、pH、水解时间对荞麦球蛋白的酶解效果,并采用正交试验优化其工艺条件。对酶解产物进行Sephadex G-25凝胶柱层析分离,并对其各分离组分清除O₂^-、·OH和DPPH·的能力及分子量分布进行了研究。对具有较强抗氧化活性的分离组分Ⅲ,进一步分析了其对H2O2所致小鼠红细胞溶血的抑制作用并确定了其氨基酸组成。实验结果显示:采用碱性蛋白酶水解荞麦球蛋白效果优于胰蛋白酶和木瓜蛋白酶;最佳工艺条件为:加酶量20000 U/g,温度55℃,pH值9,底物浓度5%,反应时间2 h;经柱层析分离得到的分子量小于1000 Da的组分Ⅲ显示了较强的抗氧化能力,其清除O₂^-、·OH与DPPH·的IC50分别为0.75 mg/mL、0.897 mg/mL和0.38 mg/mL,高于分子量较大的组分Ⅰ和未经分离的荞麦球蛋白酶解液;分离组分Ⅲ可以显著抑制H2O2引发的小鼠红细胞膜的溶血反应,其中终浓度为1.578mg/mL的分离组分Ⅲ对红细胞溶血抑制率达47.37%;氨基酸含量分析结果表明,分离组分Ⅲ中谷氨酸含量最高,胱氨酸含量最低,精氨酸、甘氨酸、赖氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸含量较高。