盐度变化对岩扇贝相关酶活性及基因表达的影响

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:qingshuiyilian
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岩扇贝(Crassadoma gigantean)隶属于软体动物门(Mollusca)、瓣鳃纲(Lamellibranchia)、珍珠贝目(Pterioida)、扇贝科(Pectinidae)、岩扇贝(Crassadoma)属,原产于北美洲的太平洋海岸,岩扇贝营底栖生活,适应温度范围很广,属于广温种,岩扇贝有较大的闭壳肌,肉鲜美,风味独特,在市场上是很受欢迎的,供不应求;此外因为它生长快速,对环境适应性强,因此,岩扇贝可以作为贝类育种的优良候选品种加以引入。2012年,为有效缓解我国扇贝育种品种短缺、病害频发、产量低、死亡率高等问题,岩扇贝作为优良品种被引入我国。岩扇贝作为我国引进的一个新品种。为了弥补中国国内盐度对岩扇贝的影响研究的空白,利用从加拿大引进的幼年岩扇贝,进行了本次实验,实验包括盐度变化对岩扇贝SOD、Na~+/K~+-ATP和谷胱甘肽还原酶三种酶活性影响的测定和转录组测序分析两部分。在第一部分盐度变化对岩扇贝SOD、Na~+/K~+-ATP和谷胱甘肽还原酶三种酶活性影响的测定实验中又分为盐度骤变实验和盐度渐变实验,均设置盐度为24、30、36三个梯度,在盐度骤变实验中我们得到了以下结论:1)Na~+/K~+-ATP酶在盐度为24时的酶活性呈现先降低后升高再降低的趋势,在盐度为30时酶活性呈现逐渐升高的趋势,在盐度为36时酶活性呈现小幅度升高之后下降的趋势。2)SOD在盐度为24时的酶活性呈现先上升后下降又上升的趋势,在盐度为30时酶活性呈现平稳上升趋势,在盐度36时酶活性呈现先小幅度上升然后下降再上升再下降的趋势。3)GR在盐度为24时的酶活性呈现先上升然后平稳再下降的趋势,在盐度为30时的酶活性呈现缓慢上升趋势,在盐度为36时酶活性呈现先升高再降低的趋势。在盐度渐变实验中我们得到以下结论:1)Na~+/K~+-ATP酶在盐度为24时酶活性呈现逐渐降低的趋势,在盐度为30时酶活性无明显波动,在盐度为36时酶活性呈现先降低又小幅上升再下降的趋势。2)SOD在盐度为24时酶活性呈现先缓慢下降最后又有小幅上升的趋势,在盐度为30时酶活性无明显波动,在盐度为36时酶活性呈现缓慢降低的趋势。3)GR在盐度为24时酶活性呈现先小幅度上下波动后缓慢下降的趋势,在盐度为30时酶活性无明显波动,在盐度为36时酶活性呈现先小幅上升后缓慢下降的趋势。综合盐度骤变和渐变实验我们得到结论:1)在三个盐度梯度的比较中,盐度为30时最适合岩扇贝生活。2)在盐度梯度24和36的比较中,盐度为24时更适合岩扇贝生活,即岩扇贝更耐低盐。在第二部分二代转录组测序实验中,我们得到以下结果:1)测序结果共得到1089条差异基因,上调基因349条,下调基因740条,其中55条成功注释到GO分类上。2)在正常盐度30对低盐度24的GO聚类中下调差异表达基因主要富集在新陈代谢、单一有机体运输、细胞膜、黏连,催化活性相关的GO term上,在正常盐度30对高盐度36的GO聚类中下调差异基因也是主要富集在上诉几种相关的GO term上,但在新陈代谢、催化活性相关GO term上富集的要更多一些,即高盐和低盐水环境中对岩扇贝的一系列生物代谢反应起到抑制作用且在高盐水环境中抑制的更加明显。3)对成功注释到KEGG上的最显著富集的20条通路进行了分析,并找到一些相关基因,如在低盐组和高盐组中MyD88基因明显下调,该基因是参与免疫反应的重要基因,AdPLA基因也有明显下调,AdPLA表达量的增加可阻止脂肪分解。说明了高盐低盐环境不仅对岩扇贝的免疫机能有明显的抑制作用外,还不利于扇贝的脂肪积累。本实验研究了不同盐度梯度对岩扇贝SOD,GR,Na~+/K~+-ATP酶活性的影响以及差异基因的对比分析,希望为岩扇贝的生化指标及基因表达研究提供依据,为今后的引种,驯化,人工育苗和成体养殖等生产实践提供指导。
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