蛋白质与有机小分子相互作用的电化学研究与应用

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该论文在B-R缓冲溶液中以滴汞电极、静汞电极、玻碳电极为工作电极,用线性扫描二阶导数极谱法、循环伏安法等电化学方法对溴百里香酚蓝、鸡冠花红、铍试剂Ⅲ、溴甲酚紫、茜素黄R等与蛋白质相互作用的条件、作用机理进行了较为详细的研究,这些有机小分子在电极上有良好的伏安还原峰电流,当加入蛋白质后,有机小分子与蛋白质发生相互作用,使有机小分子的伏安还原峰电流值降低而还原峰电位基本不变(溴百里香酚蓝的还原峰电位负移),还原峰电流的降低值与蛋白质的加入量在一定范围内成良好的线性关系.实验绘制了测定蛋白质的工作曲线,并成功的将该方法应用于人血清样品中蛋白质含量的测定,结果与经典的考马斯亮蓝G-250光度法一致.论文还进一步对蛋白质与有机小分子相互作用的机理进行了初步的探讨,计算了蛋白质与有机小分子相互作用的结合比和结合常数并对溴百里香酚蓝、鸡冠花红和铍试剂Ⅲ与蛋白质相互作用前后的电化学参数(标准速率常数Ks,电子转移系数α和标准电极电位)进行了比较,实验发现蛋白质加入前后溴百里香酚蓝、鸡冠花红和铍试剂Ⅲ的电化学参数没有明显的变化.因此初步推断有机小分子与蛋白质相互作用生成了非电化学活性的超分子复合物,降低了溶液中有机小分子的浓度,从而使有机小分子的还原峰电流降低.由于溴百里香酚蓝和溴甲酚紫是三苯甲烷类染料,鸡冠花红、铍试剂Ⅲ和茜素黄R是偶氮类染料,分子中都具有大的电子共轭环,有强的芳香性或疏水性并带有负电荷的亲水性基团,如磺酸基、羧基或酚羟基等基团,在酸性环境中带负电荷,而蛋白质带正电荷,因此论文认为两者主要通过静电作用相互而结合.
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