单环刺螠(Urechis unicinctus)多糖的分离纯化和结构研究

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单环刺螠(Urechis unicinctus)隶属为螠虫动物门、螠纲、无管螠目、刺螠科、刺螠属,主要分布于我国的黄渤海沿岸海域。本文以单环刺螠为研究对象,采用各种色谱分离技术,从单环刺螠的体壁和内脏中提取分离多糖组分,并采用化学和现代波谱方法对其理化性质、单糖组成和结构进行研究。研究结果如下:1.单环刺螠体壁多糖热水提取的得率为6.1%,经离子交换色谱和凝胶渗透色谱分离纯化得到六个多糖组分:UWA1、UWA2、UWB1、UWB2、UWB3、和UWC1.化学分析表明,六个多糖的总糖含量为51.5~99.7%、蛋白含量为0~10.1%、硫酸基含量为0~7.5%、糖醛酸含量为0~14.2%、氨基己糖含量为0~30.7%。液相色谱法分析表明,UWC1。和UWB1主要由葡萄糖组成,其含量分别为99.4%和98.3%;UWB2以葡萄糖为主,少量甘露糖、半乳糖、岩藻糖、葡萄糖胺和N-乙酰葡萄糖胺;UWA2和UWB3主要含有葡萄糖、葡糖糖胺、半乳糖醛酸和半乳糖胺;UWC1主要由葡萄糖、葡萄糖胺和岩藻糖组成。2.高效凝胶渗透色谱测定UWAl和UWBl的分子量分别为25.8kDa和43.3kDa。甲基化、红外光谱及核磁共振波谱分析表明,UWA1是由→4)-a-Glcp(1→、a-Glcp(1→、→2)-a-Glcp(1→、→4,6)-a-Glcp(1→和→2,4)-a-Glcp(1→糖基组成;UWB1主要含有→4)-a-Glcp(1→、→3,4)-a=Glcp(1→和→4,6)-a-Glcp(1→,少量a-Glcp(1→、→3)-a-Glcp(1→、→3,4,6)-a-Glcp(1→、→2)-a-Glcp(1→和→2,4)-a-Glcp(1→。3.单环刺螠内脏多糖木瓜蛋白酶提取的得率为5.7%,经离子交换色谱和凝胶渗透色谱分离纯化得到五个多糖组分:UOA1、UOB1、UOC1、UOD1和UOE1。化学分析表明,五个多糖的总糖含量为40.2~73.6%、蛋白质含量为0.7~5.8%、硫酸基含量为0~10.5%、糖醛酸含量为0~5.1%、氨基己糖含量为9.4~44.3%。高效液相色谱分析表明,UOA1主要由甘露糖和葡萄糖胺组成,UOB1主要含有葡萄糖胺,UOC1和UOD1主要由甘露糖、葡萄糖胺、半乳糖和岩藻糖组成,UOE1由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖胺和N-乙酰葡萄糖胺组成。甲基化分析表明,UOA1是由Manp(1→、→3,4)-Fucp(1→、→2)-Manp(1→、→6)-Manp(1→和→3,6)-Manp(1→组成;UOV1以→6)-Manp(1→为主,少量Fucp(1→、Manp(1→、→4)-Fucp(1→、→3,4)-Fucp(1→和→3,6)-Manp(1→;UOC1和UOD1主要由3,4)-Fucp(1→和→6)-Manp(1→组成。本论文的研究成果,对单环刺螠多糖的研究和开发利用、对“海洋糖库”的建设和发展都有重要意义。
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