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猪苓[Polyporus umbellatus (Pers.) Fries.]是一种药用真菌,菌核地下多年生,为药用部分。由于猪苓野生资源紧缺,人工栽培缺乏系统的理论基础且技术落后,致使猪苓产量逐年下滑。为加快并实现规范化栽培生产,本研究对野生高产的猪苓菌进行了分离培养,从分离方法、培养基、环境因素及营养条件等多个方面探索出最佳的培养条件,加快野生菌株的驯化;组建猪苓菌种库,从菌种资源库中筛选出性状优良的菌株进行培育;研究了菌丝、菌核生长发育过程中形态结构和有效成分含量的变化;最后,探索了猪苓菌与蜜环菌相互作用过程的结构与成分含量变化。以期为进一步了解猪苓的生长发育特性,优化猪苓栽培技术体系提供理论指导。主要研究结果如下:1.孢子分离法较菌核组织分离法具有很大的优势,GPY、PDA和麦芽汁培养基作为分离培养基,猪苓菌菌丝萌发情况和长势都较好。2.有机碳氮源比无机碳氮源更适宜菌丝的生长,尤其是碳源糊精、果糖,还有氮源蚕蛹粉、酪素,对于菌丝生长地促进作用非常显著。低浓度的生长因子可以促进菌丝生长,以玉米浆的促进效果最好,矿质元素中Mn元素促进效果最好。最适宜菌丝生长的环境条件是:初始pH值6.0,23℃,黑暗条件培养。3.用腐殖土、木棒和树叶为主要填充基质的新型代料有利于菌丝的生长,而传统代料中菌丝生长缓慢且菌核形成时间长,不利于大规模的人工纯菌种栽培。4.对10个菌株进行SPSS聚类分析和主成分分析得出,5#、2#和1#菌株的综合性状比较优良,其菌丝生长快、长势旺,产量高且多糖含量高,是初步筛选出的可以用作大规模生产繁殖优良菌株。5.野生菌核随着生长年限的增加,菌丝的分化程度越高,结构致密,表皮木质化。多糖含量不断增加,麦角甾醇的含量先降后升,总体上有了一定程度的增加。液体发酵培养的菌丝体,其多糖和麦角甾醇的含量均高于各阶段的野生菌核。6.野生菌核在蜜环菌侵染后产生了防御结构,细胞壁加厚并木质化,形成了初级、次级隔离腔。侵染后菌核的多糖和麦角甾醇含量显著增加,并呈现先升后降的趋势。