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目的:观察宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)患者宫颈脱落细胞中多肿瘤抑制因子P16(P16)和增殖细胞核抗原Ki67(Ki67)的表达,分析各样本中二者表达水平的差异及联合表达在宫颈上皮内瘤变分级诊断中的作用及意义。方法:选取2012年1月-2015年12月在长春市妇产医院治疗的92例CIN患者的宫颈脱落细胞作为观察组。将观察组92例患者依据组织学诊断结果分为3个亚组,CIN I级30例(观察A组),CIN II级34例(观察B组),CIN III级28例(观察C组)。另选取35例同期在我院治疗的非宫颈病变患者的脱落细胞作为对照组。采用免疫细胞化学法检测各样本中P16和Ki67的表达情况,对比二者在观察组及3个亚组中表达的差异,进一步分析P16/Ki67经细胞学双染二者联合表达在宫颈上皮内瘤变分级诊断中的意义。结果:(1)观察组P16和Ki67的阳性表达率分别为88.04%和85.87%,对照组P16和Ki67的阳性表达率分别为54.29%和51.43%,观察组P16和Ki67的阳性表达率均远高于对照组,存在统计学差异(P<0.05)。(2)观察组不同级别的3个亚组,A组,B组和C组的P16和Ki67阳性表达率分别为76.67%,73.33%,88.24%和85.29%,100.00%,100.00%,组间P16和Ki67阳性表达率具有统计学意义(P<0.05)。(3)CIN病情越严重,P16和Ki67阳性表达率越高,P16和Ki67阳性表达率与CIN临床分级存在中度正向相关性(r=0.453,0.512)。(4)通过对CIN不同级别样本脱落细胞进行P16/Ki67联合双染,观察A组未见P16/Ki67双染阳性细胞;观察B组有5个样本观察到P16/Ki67双染阳性细胞的存在;观察C组P16/Ki67阳性细胞的存在率为100%。结论:(1)在CIN患者宫颈脱落细胞中,P16和Ki67表达阳性率明显高于正常健康人群,且随着病情程度加重,其阳性表达率显著升高。(2)CIN患者宫颈脱落细胞中P16和Ki67阳性表达率与CIN临床分级存在正向相关性,故可将二者作为CIN病变严重程度和恶化潜能评估的重要指标在临床诊疗中推广应用。(3)P16/Ki67联合双染为CIN患者的筛查及分级诊疗提供了可靠的理论依据,有助于改善临床宫颈癌筛查的分流管理、疾病的早期确诊及适当治疗。