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表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是绿茶的主要成分。近年来因其具有抗氧化、抗炎症、减肥、抗癌等功效而受了广泛关注。但是随着研究的进展发现高浓度的EGCG在培养的海马细胞及离体脑片中会引起一些毒副作用,这些副副作用可能与电压门控通道有关。
本文研究了EGCG 对原代培养的海马神经元电压门控钾通道的影响,主要观察了EGCG 对瞬时外向钾电流IA和延迟整流钾电流IK的调节作用。运用全细胞膜片钳技术,我们研究了EGCG 对瞬时外向钾通道和延迟整流钾通道的电流-电压曲线、激活曲线、失活曲线的影响。数据显示:⑴不同剂量的EGCG可以明显抑制IA、IK 钾电流的幅度,并且具有浓度依赖性,其半数抑制浓度IC50分别为251.70±37.4 7|ìM和181.8±9.33 |ìM。⑵EGCG对IA、IK的抑制作用具有电压依赖性,随着电压向去极化方向移动抑制作用增强。⑶EGCG使IA和IK的稳态激活曲线向超极化方向移动,使得通道更容易在较负的电位下被激活,其半数激活电压V1/2分别移动了11.7mV和6.4mV。⑷EGCG使IA和IK的失活曲线向超极化方向移动,半数失活电压V1/2分别移动了20.72mV和14.86mV。而失活曲线的左移表明,在某一电位下可激活通道数目减少,这可能是EGCG 使钾电流变小的原因。⑸将激活和失活曲线左移程度进行比较,可以观察到EGCG 对IA和IK 失活曲线的影响要大于激活曲线的影响。EGCG 使钾通道激活和失活电压范围变窄,从而使可激活的通道数目减少,引起电流的下降。⑹将EGCG对IA和IK影响来看,不论是激活曲线还是失活曲线的移动程度都是IA的变化要大于IK的。这个可能是EGCG作用于IA、IK通道方式不同造成的。在神经系统中,电压门控钾电流对于神经元的兴奋性和动作电位的恢复具有重要的作用,钾通道功能异常会导致神经元发放特性的变化和异常放电。我们的研究表明高浓度EGCG对原代培养的海马神经元电压门控钾通道IA和IK的激活和失活都有较明显的作用。这提示我们在将EGCG应用于减肥、抗癌、抗炎症的时候要注意到EGCG对于电压门控通道的影响。