目的:构建靶向FNBP1 siRNA干扰载体并筛选特异高效的RNAi靶点,研究FNBP1基因沉默后对人正常的肝细胞HL-7702体外增殖以及迁移能力的影响。方法:设计并构建了3个靶向FNBP1 siRNA干扰载体(Si-1,Si-2,Si-3),经酶切和DNA测序鉴定后转染人正常的肝细胞HL-7702。RT-PCR和Western blot检测瞬时转染细胞中FNBP1基因的干扰效率,筛选出特异高效的RNAi靶点。并用G418筛选稳定表达了RNAi的细胞株,用XTT法检测细胞体外增殖率,划痕法检测细胞的迁移能力。结果:酶切和测序结果证明干扰质粒构建正确;转染特异性的干扰质粒(Si-1、Si-2、Si-3)细胞的FNBP1基因表达量与对照组相比均有所降低,3个干扰组(Si-1、Si-2、Si-3)细胞的FNBP1基因表达量分别为对照组的(66.4±1.01)%,(24.2±0.81)%,与(44.9±0.92)%,Si-1、Si-2、Si-3靶点的抑制率分别为33.6%,75.8%及55.1%,Western blot结果显示,在蛋白质水平表达也明显受到抑制,且重组干扰质粒Si-2的干扰效应较强。XTT结果显示沉默FNBP1后导致HL-7702细胞体外增殖能力显著抑制(P<0.05)。结论:构建的沉默FNBP1重组质粒Si-2能显著抑制HL-7702细胞的体外增殖能力,但并不直接影响HL-7702细胞的迁移能力。