中药指纹图谱能够体现中药成分的复杂性和相关性,是世界公认的一种能全面、综合地评价和控制中药材质量的有效手段。构建中药材的指纹图谱,使每种药材都拥有其独特的标准图谱,能够直观、系统地评价药材质量,是解决中药研究和生产过程中质量控制问题的有效手段之一。薄层色谱法(Thin Layer Chromatography,简称TLC)是色谱法中最常见的一种,也是构建中药指纹图谱的基本技术之一,它能同时分离多个样品,且所用流动相选择范围较广,可适用于各种性质的化合物,通过分析原始彩色图谱,经图像数据处理,可转化为定性、定量的直观数据,为科学工作者提供多层面的信息。但传统的TLC法存在薄层板硅胶颗粒较粗、点样方式手动化等缺陷,从而导致图谱的重现性和分辨率均较差。高效薄层色谱法(High Performance Thin Layer Chromatography,简称HPTLC)弥补了经典TLC法的不足,已成为现代实验室最常用的一项薄层技术手段之一。HPTLC法使用的薄层板粒径较小(3～8μm),并常结合自动点样装置来代替传统的手工操作,从而得到分辨率更高的色谱图,提高了分析结果的准确度和重现性。中药材薄层色谱指纹图谱研究的相关报道较多,建立的图谱大多较为清晰、美观,为中药材的鉴别和质量评价提供了参考依据,但中药材种类繁多,数量庞大,建立和完善中药材的指纹图谱需要经历一个长期的积累过程。故本课题以HPTLC法为研究手段,以草豆蔻、红豆蔻、益智、高良姜、姜黄、山柰、八角茴香、小茴香、胡椒、花椒、佩兰、石菖蒲、辛夷、细辛以及防风15种常用中药材的挥发油成分、草豆蔻黄酮类成分以及胡椒乙醇部位为研究对象,建立了上述15种药材的HPTLC指纹图谱以及不同批次药材指纹图谱的共有模式,并对每一批药材与其共有模式之间进行了相似度的比较,以此来评价不同商品来源的药材之间是否存在显著的质量差异。本课题主要研究内容概括如下:1收集10个不同商品来源的草豆蔻等15种常用中药材在广州市的不同药店和药材市场收集到了不同商品来源的草豆蔻、红豆蔻、益智、高良姜、姜黄、山柰、八角茴香、小茴香、胡椒、花椒、佩兰、石菖蒲、辛夷、细辛以及防风药材各10个不同批次,并以水蒸气蒸馏法或石油醚超声法提取各药材的挥发油成分、95%甲醇超声法提取草豆蔻药材的黄酮类成分、超声法提取胡椒药材的乙醇部位,作为本课题的研究对象。2考察草豆蔻等15种常用中药材的挥发油成分或其他成分的薄层色谱条件本实验对草豆蔻等药材的薄层色谱条件进行了较全面的考察。首先,对各药材的展开系统进行了筛选;其次,对各药材的薄层展开温度(4℃、25℃、40℃)以及薄层展开湿度(18%、32%、47%、65%、72%)分别进行了考察;然后对仪器的精密度、制样方法的重复性以及供试品溶液的稳定性进行了考察,从而最终确定了各药材的最佳薄层色谱条件。本文建立的草豆蔻等15种常用中药材薄层色谱条件均能得到重复性高、分离度好、清晰且丰富的薄层斑点。3建立草豆蔻等15种常用中药材的HPTLC指纹图谱的共有模式将草豆蔻等15种中药材的HPTLC图谱导入到CHROMAP 1.5色谱指纹图谱系统解决方案软件,获得由数个特征峰构成的各药材挥发油成分、草豆蔻黄酮类成分以及胡椒乙醇部位的指纹图谱,并指认各对照品所在特征峰的位置,同时建立了 10批不同商品来源各药材指纹图谱的共有模式。利用各药材特有的指纹图谱特征,可以直观、快速地对草豆蔻等15种常用中药材进行鉴别。此外,通过参考草豆蔻等中药材共有模式中特征峰的峰面积或者比例,可以有效地控制药材的质量,为其质量标准的制定提供参考依据。4对比和分析不同商品来源药材的质量将10批不同商品来源的草豆蔻等15种中药材的薄层色谱指纹图谱数据与其共有模式进行比较,计算夹角余弦相似度,通过相似度的比较来评价不同批次药材之间的质量差异。结果表明草豆蔻、益智、高良姜、姜黄、八角茴香、小茴香、佩兰、辛夷以及细辛9种药材不同批次之间相似度较高,说明各药店及药材市场上售卖的这9种药材质量相对稳定;红豆蔻、山柰、胡椒、花椒、石菖蒲以及防风6种药材不同批次之间相似度较低,斑点差异较大,说明各药店及药材市场上不同商品的上述6种药材存在质量差异。