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目的：制备金黄色葡萄球菌（金葡菌）EsxB蛋白及其抗血清，了解能分泌EsxB蛋白的葡萄球菌在临床感染患者中的分布情况以及EsxB抗体阳性与菌株产生耐药的相关性，推测EsxB是否能成为金葡菌疫苗的候选靶抗原，为其进一步的临床运用奠定实验基础。方法：（1）以S. aureus野生株基因组DNA为模板，用设计的esxB特异性引物进行PCR扩增得到esxB基因DNA片段。（2）将esxB克隆到原核表达载体pET-28a(+)多克隆位点中(BamH I和Xho I)，筛选阳性质粒。（3）对阳性质粒进行测序分析，将测序结果和esxB基因序列进行比对分析。（4）pET-28a(+)/esxB重组质粒经诱导表达蛋白，借助抗-HisAb用Western blotting进行鉴定。（5）用制备的蛋白对小鼠进行免疫，对获得的抗血清用ELISA方法进行效价的测定，用Western blotting进行特异性测定。（6）用补体介导的抗体杀菌试验检测抗血清的有效浓度。（7）包被EsxB蛋白用间接ELISA法检测50份正常健康对照、110例其他葡萄球菌感染患者和78例金葡菌感染患者血清样本中抗EsxB蛋白抗体的表达。（8）EsxB蛋白抗体阳性患者所相应的分离菌株用全自动微生物系统进行药敏试验的检测。结果：（1）PCR扩增得到长度为315bp的DNA片段。（2）筛选出的重组克隆阳性质粒，经鉴定，其目的片段的大小与预期相符，阳性质粒经测序，证实序列完全正确。（3）诱导表达的蛋白条带位于16KD左右，纯化的蛋白也在同一位置，经证实该蛋白条带为EsxB融合蛋白。（4）免疫小鼠制备得到的抗血清效价和特异性与预期结果相符，其有效杀菌浓度为1:4000。（5）其他葡萄球菌感染的患者EsxB抗体阳性7例，阳性率为6.4％；金葡菌感染临床样本中共有22例阳性，阳性率为28.2％，两者有显著性差异。（6）EsxB抗体阳性患者金葡菌多重耐药例数显著高于EsxB抗体阴性的金葡菌患者，且MRSA也显著增高。结论：（1）经鉴定，制备、纯化的金葡菌EsxB蛋白与预期的结果符合。（2）免疫获得的EsxB蛋白抗血清滴度、特异性高，有效杀菌效价到达要求。（3）金葡菌感染患者与其他葡萄球菌感染患者相比较，血清中EsxB蛋白抗体阳性率显著性增高，且能分泌EsxB蛋白的金葡菌毒力更强，也更易产生耐药性。（4）EsxB可以成为金葡菌疫苗的候选靶抗原，对进一步深入研究金葡菌的分子致病机制具有重要的意义，同时为其疫苗的研究奠定良好的实验基础。