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目的:脑血管病是一种致死率和致残率都非常高的常见病,其中缺血性脑血管病约占70%-80%。缺血性脑损伤涉及非常复杂的病理生理机制,血小板功能异常为缺血性脑血管病的重要诱发因素之一。补阳还五汤是临床用于治疗缺血性脑血管病的经典方剂。磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号传导通路是体内重要的细胞通路,其与血小板活化过程密切相关。本研究在复制大鼠局灶性脑缺血模型的基础上,通过对血小板活化因子(Platelet Activating Factor PAF)、CD40L、CD62P的检测,探讨补阳还五汤对血小板活性的影响;并通过对PI3K/Akt信号通路中Akt蛋白表达情况的研究,探讨补阳还五汤抑制大鼠脑缺血损伤的作用机制。为中医药治疗缺血性脑血管病提供新思路,为临床用药提供科学依据。方法:1.动物实验将100只SPF级SD雄性大鼠,随机分成5组(每组20只):假手术组,模型组,阳性(硫酸氢氯吡格雷)组(6.8mg·kg-1),补阳还五汤高、低剂量组(26,13g·kg-1)。假手术组和模型组给予蒸馏水。给药剂量根据动物体表面积公式换算。连续给药14天后,采用改良线栓法复制大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)再灌注模型,脑缺血1小时再灌注6小时之后进行神经功能缺失评分。2.检测指标和方法采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死面积;采用苏木精-伊红(HE)染色法观察大脑皮质区和海马CA1区神经细胞形态变化;采用水溶性四氮唑(WST)-1法检测脑组织SOD活性,采用硫代巴比妥酸(TBA)法检测血清MDA含量;采用酶联免疫(Elisa)法检测血清中PAF、CD40L、CD62P含量;采用免疫组织化学方法(IHC)检测脑组织海马区中p-Akt(Ser473)和Akt(Ser473)蛋白表达;采用免疫印迹法(WB)检测脑组织海马区中p-Akt和Akt蛋白表达的变化情况。结果神经功能评分,TTC染色结果证明大鼠MCAO再灌注模型复制成功。补阳还五汤高、低剂量组能降低MCAO再灌注大鼠神经功能缺失评分,减少脑梗死面积,改善脑组织海马CA1区、皮质区病理损伤,改善神经细胞结构和细胞核固缩情况,缓解神经系统损伤;升高脑组织中总SOD活性,降低血清中MDA含量,改善自由基平衡状态;降低血清中PAF、CD40L、CD62p含量,抑制血小板活化;升高脑组织中p-Akt蛋白含量,激活PI3K/Akt信号传导通路。以补阳还五汤高剂量组效果为佳。结论补阳还五汤预处理可以有效抑制血小板活化、上调p-Akt的表达,提示补阳还五汤对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织具有一定的保护作用,其机制可能与抑制血小板活化和PI3K/Akt信号通路的调节有关。