【摘 要】
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目的:本实验通过高脂饮食（HFD）诱导C57小鼠建立NAFLD体内模型,游离脂肪酸混合物（油酸/棕榈酸,2:1）处理Hep G2细胞建立体外脂质沉积模型,观察岩白菜素（BER）非酒精性脂肪肝的保护作用,从而进一步探讨SIRT1/NF-κB炎症途径和AMPK/Nrf2氧化应激、脂质代谢途径的作用,寻找减轻肝功能紊乱和治疗非酒精性脂肪肝病的新方法。方法:80只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组（n
【基金项目】
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广西自然科学基金（编号:2017GXNSFAA198326）；
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目的:本实验通过高脂饮食（HFD）诱导C57小鼠建立NAFLD体内模型,游离脂肪酸混合物（油酸/棕榈酸,2:1）处理Hep G2细胞建立体外脂质沉积模型,观察岩白菜素（BER）非酒精性脂肪肝的保护作用,从而进一步探讨SIRT1/NF-κB炎症途径和AMPK/Nrf2氧化应激、脂质代谢途径的作用,寻找减轻肝功能紊乱和治疗非酒精性脂肪肝病的新方法。方法:80只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组（n=15）、BER 80组（n=10）和建模组（n=55）。正常组、BER 80组饲喂正常饲料,建模组饲喂高脂饲料（HFD）。持续8周后,从正常组和建模组各随机取5只小鼠进行病理检查及生化指标检测,判断NAFLD模型是否成功。NAFLD模型成功建立后,将建模组50只小鼠随机分为HFD组,HFD+Silymarin组,HFD+BER 20组,HFD+BER 40组,HFD+BER 80组,每组10只。正常组给予正常饮食,BER 80组给予正常饮食同时每天灌胃80 mg/kg BER,HFD组饲喂高脂饲料,HFD+Silymarin组喂养高脂饲料的同时灌胃（150mg/kg）水飞蓟素,HFD+BER组（HFD+BER 20,HFD+BER 40,HFD+BER 80组）喂养高脂饲料同时给予相应剂量（20,40,80 mg/kg）BER,持续6周。采用苏木精-伊红染色（HE）法观察肝组织病理变化情况;运用生化法从血清或肝组织检测肝功能水平、脂质水平、空腹血糖（FBG）、空腹血清胰岛素（FINS）、游离脂肪酸（FFA）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性或含量;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肝脏中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）和白介素-1β（IL-1β）的表达水平;RT-PCR技术和Western blot检测SIRT1/NF-κB和AMPK/Nrf2通路的m RNA或蛋白表达水平。Hep G2细胞分为正常组、FFA组和FFA+BER低中高剂量组（8,16,32μM）。MTT法检测各组细胞的存活率,Oil Red O（ORO）染色法观察Hep G2细胞的脂质沉积状况,RT-PCR技术和Western blot检测SIRT1/NF-κB和AMPK/Nrf2通路的m RNA或蛋白表达水平。结果:（1）病理检查及生化指标检测证实NAFLD模型建立成功。（2）BER对HFD诱导的非酒精性脂肪肝小鼠有保护作用,能显著改善肝功能紊乱。（3）生化法和ELISA结果显示,BER能有效降低炎症反应和氧化应激,调节脂质代谢,对肝组织发挥保护作用。（4）HE染色结果表明,BER可以有效改善肝组织脂肪变性和坏死状况。（5）ORO染色结果显示,BER可以降低FFA干预Hep G2细胞后的脂质沉积状况。（6）BER能调节SIRT1/NF-κB和AMPK/Nrf2通路,明显下调p-NF-κB p65、TNF-α、IL-6、IL-1β、SREBP-1和FAS的表达,上调SIRT1、AMPK、Nrf2和HO-1的表达。结论:BER可以通过抑制炎症反应和氧化应激,改善脂质代谢,发挥保护肝脏作用。
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