【摘 要】
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目的:使用特异性siRNA靶向干扰黑素瘤A375细胞中hTERT基因的表达后,观察对黑素瘤细胞迁移和侵袭能力的影响,从而探索hTERT基因在黑素瘤发病过程中的作用。方法:培养黑素瘤A375细胞,分别设置空白对照组、阴性对照组和干扰组。干扰组的黑素瘤A375细胞转染课题组前期筛选出的特异性hTERT siRNA,阴性对照组则使用阴性对照siRNA对细胞进行转染,空白对照组细胞不做处理。Real-Ti
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目的:使用特异性siRNA靶向干扰黑素瘤A375细胞中hTERT基因的表达后,观察对黑素瘤细胞迁移和侵袭能力的影响,从而探索hTERT基因在黑素瘤发病过程中的作用。方法:培养黑素瘤A375细胞,分别设置空白对照组、阴性对照组和干扰组。干扰组的黑素瘤A375细胞转染课题组前期筛选出的特异性hTERT siRNA,阴性对照组则使用阴性对照siRNA对细胞进行转染,空白对照组细胞不做处理。Real-Time PCR和Western-blot实验分别检测各组细胞中hTERT m RNA和蛋白的表达水平,之后使用细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力。结果:干扰组中使用特异性hTERT siRNA靶向干扰hTERT基因可明显下调hTERT基因m RNA和蛋白的表达,与阴性对照组和空白对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示,当黑素瘤A375细胞中hTERT基因表达沉默后,细胞的迁移和侵袭能力也出现明显下降(P<0.05)。结论:特异性hTERT siRNA可以有效沉默黑素瘤A375细胞中hTERT基因的表达,并抑制恶性黑素瘤A375细胞的迁移和侵袭能力。
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