NMES1基因在肺鳞癌组织中表达情况的初步研究利用Atlas微阵列膜初步分析肺鳞癌组织的基因表达谱

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NMES1(Normal mucosa of esophagus specific 1)是分子肿瘤学国家重点实验室博士研究生周津同学应用抑制消减杂交(SSH)方法从食管癌组织中分离到的三个表达发生改变的新基因之一。在食管癌与癌旁组织的Northern杂交及RT-PCR分析中,均显示NMES1在食管癌组织中表达明显低于对应癌旁组织,显示其表达的下调与食管癌的发生发展有着密切的联系。为了解NMES1基因在肺鳞癌与癌旁配对组织中的表达情况,应用RT-PCR和Western印迹的方法对肺鳞癌成对组织中的NMES1基因进行了检测。结果发现在30对肺鳞癌组织中,24对(80%)中在癌组织中表达上调。提示在肺鳞癌的发生过程中该基因可能发挥与食管鳞癌不同的作用。 为初步了解肺鳞癌及癌旁组织的基因表达谱的改变并探讨cDNA微阵列表达分析滤膜在肿瘤研究中的应用价值。提取肺鳞癌及癌旁组织总RNA,逆转录成α-32P-dATP标记的cDNA探针,与含有588个肿瘤相关基因的AtlasTM Human Cancer cDNA Expression Array杂交。放射自显影后利用扫描杂交信号灰度的强弱在专用的AtlasImageTM软件分析后得出结果。结果发现肺鳞癌组织中,肿瘤坏死因子受体(TNFR)等16个基因表达上调,白介素13前体等8个基因表达下调。从中选取4个差异表达基因(CASP10、TNFR、CK-14、CAV2),合成引物后利用30对肺鳞癌配对组织进行RT-PCR检测,发现其表达趋势与Atlas微阵列分析结果一致。结论:肺鳞癌恶性表型是由其发生过程中多个基因表达的复杂变化决定的。Atlas微阵列表达分析滤膜是研究基因表达谱的较好方法。
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