金龟子绿僵菌(Metarhiziumanisopliae)是一种广谱的昆虫病原真菌,具有不污染环境,无残留,对人畜无害等优点,被认为是一种环境友好型生物杀虫剂。不利的环境条件如紫外线、高温等会影响微生物制剂的功效。在野外试验中,紫外线和高温降低了孢子的存活率和毒力,从而阻碍了金龟子绿僵菌分生孢子的作用。若能够提高金龟子绿僵菌的产孢量,紫外抗性等性能,将有助于保持分生孢子的活力,萌发能力和毒力,提高金龟子绿僵菌的应用能力。为提高金龟子绿僵菌的应用能力,本研究以金龟子绿僵菌421为出发菌株,利用常压室温等离子体(ARTP)和紫外复合诱变选育出耐紫外、耐热和毒力强等优良金龟子绿僵菌菌株,对获得的突变菌株的生物学特性进行探究,并对突变菌株的固态发酵进行了单因素和响应面条件优化。研究成果如下:(1)采用ARTP和紫外线复合诱变处理金龟子绿僵菌,通过比较产孢快慢和生长直径大小进行初筛,用抗紫外能力和毒力作为复筛指标选育菌株,并对育种获得的突变株进行遗传稳定性试验,最终在ARTP 40 s和紫外120 s时筛选出一株产孢量高,耐紫外线,毒力强,遗传稳定的优良菌株AU34。该菌株产孢时间比原始菌株快,产孢量为1.63±0.22(108个孢子/cm2),较原始菌株提高了 163%。经紫外照射5 min后,诱变菌株AU34存活率为3.18%,比原始菌株更耐紫外照射。并且诱变菌株AU34对小菜蛾的毒力强,校正死亡率为85.71%,半数致死时间(LT50)为6.12d。传代培养6代后,诱变菌株AU34的产孢量无明显变化,具有良好的遗传稳定性。(2)对诱变菌株AU34的生物学特性,主要是耐热性,紫外耐受性,耐渗透胁迫进行了探究。发现诱变菌株AU34对温度的耐受能力相对原始菌株较强,诱变菌株AU34在35℃-50℃的萌发率高于原始菌株,两株菌株在55℃生长均较慢,在60℃都已无法生长,且在不同时间处理后,诱变菌株AU34的形态都较原始菌株饱满。对诱变菌株AU34和原始菌株进行了不同浓度的紫外耐受性和毒力进行了比较,结果表明AU34的抗紫外线能力和致病能力较强。测量了两株菌株在不同盐浓度下的生长直径变化,结果表明随着盐浓度的增加,两株菌株的生长和产孢能力逐渐减弱,但AU34的耐渗透能力相对较好。(3)探究了不同培养基质,维生素,添加剂和含水量等对金龟子绿僵菌产孢的影响,通过单因素及响应面试验方法优化了诱变菌株AU34的固态发酵条件。得到最佳培养基配方为玉米粉与稻壳质量比为1.79:1,维生素B1添加量为0.04%,CaCO3添加量0.09%,含水量为59.25%,pH 6,接种量6%,在此条件下理论产孢量为12.44×108个孢子/g,实际试验得到产孢量为11.96×108个孢子/g。