拟南芥中RNA聚合酶Ⅲ转录的AtR18非编码RNA研究

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非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是指生物基因组内不编码蛋白质的RNA,曾被认为是与基因表达无关的“基因垃圾”。研究表明,大部分植物基因组被转录成非编码RNA,它们通过与蛋白分子等相互结合,在转录、转录后及翻译水平开启或关闭基因,实现调控靶基因表达的关键作用,影响植物萌发、花粉形成、新陈代谢等生理过程,并响应多种生物及非生物胁迫。AtR18 ncRNA(151nt)是2012年在拟南芥(Arabidopsis thalina)中发现的由RNA聚合酶Ⅲ转录的非编码RNA,目前尚未被报道。对拟南芥中AtR18ncRNA进行研究,获得结果如下:1.Northern blot法以及整体原位杂交法,AtR18 ncRNA在拟南芥种子萌发阶段伸出胚轴尖端大量表达,并响应ABA、Mannitol等多种应激环境。2.构建AtR18 ncRNA过表达拟南芥植物,统计了 ABA及Mannitol应激条件下,野生型拟南芥(Wt)及AtR18 ncRNA过表达拟南芥(AtR18-1#、AtR18-3#)种子萌发率,发现AtR18ncRNA过表达提高了拟南芥种子对ABA应激的敏感性,降低了拟南芥种子对干旱应激的敏感性。3.分析了 AtR18 ncRNA3’端侧翼AtMYC1基因。AtMYC1基因在种子萌发期大量表达,并响应ABA、Mannitol等多种应激环境,统计了ABA及Mannitol应激条件下,野生型拟南芥(Wt)及atmyc1缺失突变体拟南芥(salk-15、cs-5)种子萌发率,发现atmyc1缺失突变体提高了拟南芥种子对ABA应激的敏感性,降低了拟南芥种子对干旱应激的敏感性。4.AtR18 ncRNA可能抑制种子萌发,AtMYC1基因可能诱导种子萌发。AtMYC1基因通过影响了SnRK2.2、ABI3、EM1和EM6等ABA信号径路重要基因表达,响应ABA应激。AtR18 ncRNA响应ABA及干旱胁迫的详细作用机制,以及二者是否具有转录干涉作用尚不明确,有待继续进行深入研究。
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