‘红星’梨果实采后果皮褐变的机理研究

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‘红星’梨(Pyrus communis)作为典型的红色西洋梨品种深受消费者的喜爱。然而,相比于‘康佛伦斯’等其他西洋梨品种,‘红星’梨在采后低温贮藏后极易在货架期发生果皮褐变的情况,并且扩展快、能覆盖大部分果面,造成严重损失。本研究以‘红星’果实为材料,通过对比不易褐变的品种‘康佛伦斯’,对‘红星’果实易褐变的原因进行了探究;并调查了冷藏时间和不同化学试剂对‘红星’褐变的影响,结合转录组测序对其果皮褐变的机理进行了初步探究。主要研究结果如下:1.‘红星’梨品种特有的酚类成分可能是造成其容易褐变的重要原因,且‘红星’中的酶促褐变主要由漆酶介导。比较了易褐变的‘红星’和不易褐变的‘康佛伦斯’果实的褐变发展,发现前者发展快、边界清,与软虎皮病(soft scald)形态相似;后者发展慢、症状轻,伴随果实衰老。测量了‘红星’和‘康佛伦斯’果实的生理指标后,发现这两个品种在货架期的乙烯释放、果皮相对渗透率、丙二醛含量和其各自果皮褐变发展正相关,但品种间并没有显著差异。‘红星’和‘康佛伦斯’果皮组织中含量最高的酚类物质均为表儿茶素和花青苷,但‘红星’果皮中表儿茶素(158.0 mg kg-1)和花青苷(54.2 mg kg-1)远高于‘康佛伦斯’的果皮,并对酶促褐变贡献极大;‘康佛伦斯’中只检测到少量的表儿茶素(35.3 mg kg-1)和花青苷(34.5 mg kg-1),且与其对褐变症状的抵抗力一致,表明不同品种特有的酚类成分可能与褐变的易感性有关。此外,漆酶介导的酶促褐变参与了两个品种果皮中褐变发展,并与漆酶偶联的Pc TT10的表达介导了这两个品种果皮的酶促褐变;尤其在‘红星’果皮中,Pc TT10的表达能增长到1 d的1000倍左右,且漆酶活力占检测到总多酚氧化酶活力的90%以上。2.‘红星’梨的果皮褐变是一种冷害导致的生理病害软虎皮病(soft scald),缩短冷藏时间、外源腐胺或1-MCP处理能有效减轻、预防‘红星’梨中该疾病的发展。将‘红星’梨进行0 d、3 d、6 d、10 d、20 d、30 d、60 d和90 d的1℃低温冷藏后,其果皮褐变只会在冷藏30 d后开始出现,并随冷藏时间的延长而加重,符合冷害的特征;且冷藏期间果皮的α-法尼烯的积累和其合成基因的表达变化并不大,表明‘红星’果皮褐变不是虎皮病,而是冷害导致的软虎皮病(soft scald)。为了减轻贮藏冷害,我们在采收后冷藏前对‘红星’果实进行了不同浓度的腐胺、精胺和亚精胺处理,并最终确定了1 m M腐胺作为最有效的多胺正式处理,以实验室前期试验发现的有效褐变抑制剂300 n L L-1 1-MCP作为阳性对照。测定了所有果实在货架期9 d内的各项生理指标后发现:腐胺处理将‘红星’果实褐变率降低到了36.9%,且果实在货架期3 d内正常软化;1-MCP处理预防了‘红星’果实褐变,但其软化、颜色转变和可溶性固形物变化均被明显延迟,呼吸和乙烯释放也1-MCP被抑制。此外,腐胺和1-MCP处理都提高了‘红星’梨果皮冷藏后的内源腐胺含量。3.外源腐胺和1-MCP处理都抑制了主要由漆酶介导的类黄酮氧化和酶促褐变反应、不同程度影响了植物激素生物合成和信号转导通路,后者还影响了淀粉和蔗糖代谢、呼吸代谢和细胞壁代谢等途径的多个基因来影响‘红星’果实的成熟衰老。将腐胺和1-MCP处理的果实在货架期6 d时的果皮进行转录组测序测序、注释和KEGG富集,发现腐胺和1-MCP缓解软虎皮病的主要共同途径是抑制类黄酮氧化和漆酶主导的酶促褐变:筛选到了3个与果皮褐变发展高度相关、且在处理组中被显著抑制的的漆酶基因(Pc LAC7、Pc LAC9和Pc LAC15/Pc TT10)和3个在虽然在处理中被下调但在货架期表达下降的PPO基因;腐胺和1-MCP抑制了主要由漆酶介导的酶促褐变,尤其是1-MCP。此外,腐胺和1-MCP不同程度影响了多个负责乙烯、脱落酸和茉莉酸生物合成和信号转导的基因,降低了乙烯释放和脱落酸含量;后者还特异影响了淀粉和蔗糖代谢、呼吸代谢、细胞壁代谢、角质、栓质和蜡的生物合成等通路,导致果实成熟延缓。腐胺和1-MCP处理引起的生理和转录水平上的差异让我们推测,除冷害,果实衰老可能也与‘红星’果实软虎皮病发展和漆酶大量表达有密切联系。
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