LyP-1/SiO<,2>纳米复合物对肝癌靶向性的实验研究

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目的研究LyP-1/SiO2纳米复合物对肝癌的靶向性及其应用前景。方法通过静电自组装,在SiO2纳米颗粒表面依次修饰带正电的聚二甲基二烯丙基氯化胺(Poly(diallyldimethylammoniumchloride),PDAMAC)和带负电的聚丙烯酸(Poly(acrylic acid),PAA),获得羧基化的SiO2纳米粒子。进而将PAA上的羧基在1-乙基-3(3-二甲基胺基丙基)碳二亚胺盐酸盐(1-ethyl-3(3-dimethylamino propyl)—carbodiimide,EDC)活化下与Lye-1(CGNKRTRGC)上的氨基发生反应,从而使LyP-1成功地连接到SiO2纳米颗粒表面形成LyP-1/SiO2纳米复合物。用荧光标记的LyP-1与HepG2细胞培养,荧光显微镜下观察荧光与细胞结合情况,并以MDA-MB-231细胞作为阳性对照,L-02细胞及FITC作阴性对照。将荧光标记过的LyP-1/SiO2纳米复合物与HepG2细胞培养,荧光显微镜下观察荧光与细胞结合情况。将荧光标记过的LyP-1/SiO2纳米复合物通过尾静脉注射入皮下种植HepG2移植瘤的裸鼠,循环一定时间后在荧光显微镜下观察肿瘤、肝脏、脾脏和肾脏的冰冻切片。结果与LyP-1共培养后观察到MDA-MB-231细胞内明显有荧光,HepG2细胞也可见荧光,但HepG2组较MDA-MB-231组荧光强度稍弱。FITC与L-02与HepG2共培养组无明显荧光。LyP-1/SiO2纳米复合物与HepG2共培养后可在细胞中观察到荧光,荧光强度与LyP-1的HepG2组类似。注射荧光标记LyP-1/SiO2纳米复合物的裸鼠移植瘤切片可见荧光。裸鼠肝脏、肾脏未见明显荧光,脾脏可见少量荧光。结论LyP-1对SiO2纳米颗粒的修饰提供了一种简便高效制备靶向性纳米载体的方法,为将来的纳米载体制备的大规模开发提供前提。而LyP-1/SiO2纳米复合物能与HepG2细胞及HepG2裸鼠移植瘤组织特异性地结合,这将为肝癌靶向治疗提供新型的靶向性纳米载体。
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