结直肠癌组织中COX-2和p-STAT3的表达与临床病理特征相关性研究

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目的:胃肠道肿瘤是严重威胁人类健康的疾病,其中结直肠癌是当前最常见的恶性肿瘤之一。结直肠癌的发生发展是一个由遗传和环境因素共同参与的多方面、多步骤的发展过程,涉及多种基因突变的积累,揭示结直肠癌的分子发生机制已成为医学界研究的热点。   环氧化酶-2(cyclooxygnase-2,COX-2)是环氧化酶(cyclooxygenase,COX)重要的同工酶之一,其主要功能是参与多种病理生理反应,特别是与肿瘤的发生发展有关。研究发现COX-2在大部分结肠腺癌和结肠腺瘤中表达升高。信号转导与转录激活因子STAT、(Signal Transducer andActivator of Transcription)是一利重要的信号级联分子,参与细胞生长、分化、分裂及发育等多种生理过程,并在细胞的恶性转化中起重要作用,STAT3是STATs家族的重要成员,是一种癌基因,与多种肿瘤的发生、发展密切相关。多项研究表明,STAT3通过磷酸化激活后(p-STAT3)可导致细胞的异常增殖和凋亡障碍,促进肿瘤的形成和发展。   本实验采用SP免疫组织化学方法对48例结直肠癌、相应近端癌旁组织(距癌组织3cm)和20例正常结直肠组织进行COX-2与p-STAT3蛋白表达的检测。以探讨结直肠癌发生及COX-2与p-STAT3蛋白表达与临床病理特征之间的关系。   方法:研究对象为在2006年7月至2007年5月期间在河北医科大学第二医院外科接受治疗的48例结直肠癌的患者,取患者癌组织、相应近端癌旁组织(距癌组织3cm)、20例正常结直肠组织(为外伤、息肉、溃疡病需手术切除的正常结直肠组织)。所取标本经10%福尔马林溶液固定、石蜡包埋、4μm连续切片备用。癌组织均经病理医师确诊。COX-2兔抗人多克隆抗体为美国LABVISION公司产品,工作浓度1:100;p-STAT3兔抗人多克隆抗体为美国Cell Signaling公司产品,工作浓度1:100;两种抗体均购自北京中杉金桥生物技术有限公司;SP免疫组化试剂盒、DAB试剂盒亦购于北京中杉金桥生物技术有限公司。SP免疫组织化学方法对48例结直肠癌、相应近端癌旁组织(距癌组织3cm)和20例正常结直肠组织进行COX-2与p-STAT3蛋白表达的检测。采用SPSS13.0统计软件进行统计学数据处理,计数资料用x2检验,P<0.05为差异具有统计学意义。应用非参数统计中Spearman等级相关对二者在结直肠癌中的表达相互间关系进行分析。   结果:1 COX-2和p-STAT3蛋白在结直肠癌组织及对照组织中的表达   1.1 COX-2阳性表达率在癌组织为89.59%(43/48),在近端癌旁组织为35.42%(17/48),在正常结直肠组织为5.00%(1/20)。COX-2在癌组织中阳性表达率显著高于近端癌旁组织及正常结直肠组织(P<0.05),且近端癌旁组织阳性表达率明显高于正常结直肠组织(P<0.05)。   1.2 p-STAT3阳性表达率在癌组织为81.25%(39/48),在近端癌旁组织为70.83%(34/48),在正常结直肠组织为25.00%(5/20)。p-STAT3在癌组织及近端癌旁组织中的阳性表达率显著高于正常结直肠组织(P<0.05),而癌组织及近端癌旁组织中表达无显著差异(P>0.05)。   2结直肠癌患者癌组织中COX-2和p-STAT3蛋白表达与临床病理特征之间的关系   2.1 COX-2阳性表达率与结直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤发生的部位、是否侵透浆膜、大体类型均无明显相关(P>0.05),但与肿瘤分化程度、Dukes分期、淋巴结转移呈正相关。(相关系数分别为rs=0.369、rs=0.356、rs=0.356,P<0.05)。分化程度越高、肿瘤分期晚期、有淋巴结转移的癌组织中,COX-2阳性表达率越高。   2.2 p-STAT3阳性表达率亦与结直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤发生的部位、是否侵透浆膜、大体类型均无明显相关(P>0.05),但与肿瘤分化程度、Dukes分期、淋巴结转移呈正相关。(相关系数分别为rs=0.542、rs=0.457、rs=0.457,P<0.05)。分化程度越高,肿瘤分期晚期、有淋巴结转移的癌组织中,p-STAT3阳性表达率越高。   3 COX-2与p-STAT3蛋白表达在结直肠癌组织中阳性表达率呈正相关(rs=0.339,P<0.05)。   结论:(1) COX-2与p-STAT3在结直肠癌组织中均呈阳性表达,其中COX-2在癌组织中阳性表达率高于近端癌旁组织及正常结直肠组织,近端癌旁组织阳性表达率高于正常结直肠组织。p-STAT3在癌组织及近端癌旁组织中的阳性表达率高于正常结直肠组织,而癌组织及近端癌旁组织中表达无明显差异。(2)COX-2阳性表达率与肿瘤分化程度、Dukes分期、淋巴结转移呈正相关。(3)p-STAT3阳性表达率方与肿瘤分化程度、Dukes分期、淋巴结转移呈正相关。(4)COX-2与p-STAT3在散发性结直肠癌中的表达呈正相关。由此推测COX-2基因表达调控可能与JAK/STAT3信号通路有关,二者共同参与了结直肠癌的发生、发展,导致了恶性肿瘤的形成。
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