苏合香吸嗅对炎症抑郁小鼠行为学影响及初步机制研究

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目的:明确苏合香吸嗅对炎症刺激致抑郁小鼠行为的影响,并进一步探究苏合香吸嗅对抑郁小鼠的作用途径。方法:本研究运用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)腹腔注射诱导炎症应激的方法建造小鼠抑郁模型,应用10%苏合香精油进行干预,观察其效果,并使用硫酸锌滴鼻灌洗的方式建造小鼠嗅觉障碍模型探讨苏合香吸嗅对抑郁小鼠的影响是否通过嗅觉进行介导。小鼠行为学测试方法:利用悬尾测试(Tail suspension test,TST)和强迫游泳测试(Forced swimming test,FST)评价小鼠抑郁样行为;旷场测试(Open field test,OFT)和新颖抑制摄食测试(Novelty suppressed feeding test,NSFT)评价小鼠焦虑行为;埋藏食物小球测试(Buried food test,BFT)评价小鼠嗅觉功能。苏合香吸嗅干预方法:用20 m L 10%的苏合香精油混悬液浸湿棉球,将浸湿的棉球放入网状铁丝球中,置于苏合香吸嗅专用长方体塑料盒中,供小鼠吸嗅,每次吸嗅后及时更换棉球。1. 急性应激小鼠行为学实验:30只小鼠随机分为溶媒组、苏合香吸嗅10分钟组和苏合香吸嗅30分钟组。溶媒组、苏合香吸嗅10分钟和30分钟组分别进行溶媒、苏合香精油10分钟和30分钟的吸嗅,连续干预9天后,进行行为学测试,并以行为学测试过程做为急性应激过程。行为学测试(急性应激)前30分钟,各组再次进行吸嗅,以观察苏合香吸嗅对各组小鼠应对急性应激的行为。2.炎症致抑郁小鼠行为学实验:40只小鼠随机分为对照组、抑郁模型组、抑郁模型+苏合香吸嗅10分钟组、抑郁模型+苏合香吸嗅30分钟组。抑郁模型组、苏合香吸嗅10分钟和30分钟组分别进行溶媒、苏合香精油10分钟和30分钟的吸嗅,连续干预9天。在第9天吸嗅结束后腹腔注射LPS建造小鼠抑郁模型,第10天开始进行行为学测试检测造模效果与苏合香吸嗅效果,每次行为学测试前30分钟再次进行吸嗅,观察各组小鼠行为学变化。3.嗅觉障碍小鼠模型行为学实验:32只小鼠随机分为假手术组(n=16)和嗅觉障碍组(n=16),假手术组接受Na Cl滴鼻7天,嗅觉障碍组接受Zn SO4滴鼻7天。第八天进行嗅觉功能测试。随后,将假手术组再进行随机分组,分为假手术+溶媒组、假手术+苏合香组;将嗅觉障碍组随机分为嗅觉障碍模型+溶媒组、嗅觉障碍模型组+苏合香组,每组8只。然后开始分别进行吸嗅,溶媒各组吸嗅溶剂吐温80,苏合香各组吸嗅苏合香精油30分钟,连续吸嗅9天后,后开始行为学测试,每次行为学测试前30分钟再次进行吸嗅,各组吸嗅情况同上,观察各组小鼠行为学变化。结果:1. 苏合香精油吸嗅显著降低了急性应激诱发的小鼠抑郁和焦虑样行为。苏合香精油吸嗅缩短了小鼠在TST的悬吊总不动时间(P<0.05)而对不动潜伏期没有影响(P>0.05);苏合香精油吸嗅30 min缩短了小鼠在FST的漂浮总不动时间(P<0.01)并且显著延长了不动潜伏期(P<0.01)。苏合香吸嗅30 min增加了小鼠在OFT的中央停留时间(P<0.05)而对运行总路程没有影响(P>0.05);苏合香精油吸嗅缩短了小鼠在NSFT的摄食潜伏期(P<0.01)并且显著增加了摄食总量(P<0.01)。2. 苏合香精油吸嗅显著逆转了炎症刺激诱发的小鼠抑郁样行为。行为学测试结果显示,注射LPS的小鼠在TST中的悬吊总不动时间明显延长(P<0.01),不动潜伏期缩短(P<0.01);在FST中的漂浮总不动时间明显延长(P<0.01),不动潜伏期缩短(P<0.05);在OFT的中央停留时间(P<0.05)和运行总路程明显缩短(P<0.01);对NSFT测试中摄食潜伏期(P>0.05)及摄食总量(P>0.05)无影响。苏合香精油吸嗅显著逆转了LPS诱发的TST中小鼠悬吊总不动时间的延长(P<0.05)和不动潜伏期的缩短(P<0.01);显著逆转了LPS诱发的FST中小鼠漂浮总不动时间的延长(P<0.001)而对不动潜伏期没有影响(P>0.05)。苏合香精油吸嗅对LPS诱发的OFT中小鼠中央停留时间缩短和运行总路程缩短没有影响(P>0.05);对NSFT中摄食潜伏期(P>0.05)及摄食总量(P>0.05)无影响。3. 嗅觉系统参与了苏合香的抗抑郁作用。行为学测试结果显示,不论是在吸嗅前或吸嗅后,硫酸锌滴鼻的小鼠在BFT测试中找到埋藏食物小球的时间都明显延长(P<0.001)。假手术+苏合香组小鼠与其他三组相比在TST中的悬吊不动时间明显缩短(P<0.05)而对不动潜伏期没有影响(P>0.05);假手术+苏合香组小鼠与假手术+溶媒组、嗅觉障碍模型+苏合香组相比在FST中的漂浮不动时间明显缩短(P<0.05)而对不动潜伏期没有影响(P>0.05)。苏合香精油吸嗅对OFT测试的中央停留时间和运行总路程均没有影响(P>0.05);硫酸锌滴鼻明显延长了小鼠在OFT测试中的运行总路程(P<0.05)。结论:1.苏合香精油吸嗅具有抗抑郁焦虑活性。2.苏合香精油吸嗅可以逆转炎症刺激诱发的小鼠抑郁样行为。3. 苏合香的抗抑郁作用可能涉及嗅觉系统的参与。
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