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越来越多的研究表明,由病毒感染诱导的氧化应激所导致的组织损伤,是病毒重要的致病机制之一。而核因子E2相关因子2(Nuclear factor-E2related factor2, Nrf2)是机体在应对氧化刺激时,启动细胞防御体系的关键调控因子。由Nrf2/ARE信号转导通路介导的下游效应基因在细胞解毒,抗氧化、抗炎症、抗凋亡等方面发挥着重要作用；同时,也可能影响病毒的入侵、复制、组装、释放等过程。因此,有必要深入探讨Nrf2与病毒的相互作用,以便为病毒性疾病的预防和治疗提供新的解决策略。本研究以黑头软口鲦上皮瘤细胞(Epithelioma Papulosum Cyprini, EPC)为实验材料,克隆得到黑头软口鲦(Pimephales promelas) Nrf2基因的全长cDNA。以此为基础,在细胞水平上,探讨了鲤春病毒血症病毒(SVCV)感染对核转录因子Nrf2转录和表达的影响以及Nrf2的激活对SVCV复制水平的影响。主要结论如下：1.黑头软口鲦Nrf2基因cDNA的克隆及系统进化分析利用反转录-PCR及3’/5’-RACE技术从EPC细胞中克隆得到了黑头软口鲦Nrf2基因的cDNA。该cDNA全长2115bp,其中,3’端非编码区为159bp,并含有一个Poly A加尾信号(AATAAA),5’端非编码区为183bp。开放阅读框ORF共1773bp,编码590AA。功能预测显示,Nrf2含有一个CNC-bZip特征序列(AA441-AA552)。氨基酸序列比对分析表明,黑头软口鲦Nrf2与哺乳动物、鸟类及其他鱼类的Nrf2基因同源。与鱼类的同源性较高(52.5%-82.1%),且与斑马鱼的同源性最高,为82.1%；而与人、鼠、原鸡的同源性相对较低,分别为46.7%、45.9%,46.3%。2SVCV感染对Nrf2表达的影响研究利用Real-time PCR及Western blot技术,在细胞水平上分析了SVCV感染对Nrf2表达策略的影响。结果显示,Nrf2的基因转录水平逐渐增加,并在感染后12h达到峰值,随后略微下降,但仍高于未感染组。而Nrf2的核蛋白和总蛋白含量,在感染初期3-6h内,有明显的提升,并且随着感染的进行,表现出逐渐增加的趋势；同时,在感染后期,仍维持较高水平的蛋白表达量。上述结果表明,SVCV感染能激活Nrf2,增加其基因转录和蛋白表达,导致Nrf2在细胞核内的累积。3.Nrf2的激活对SVCV感染的影响研究用MTT法测定了两种常用激活剂CDDO-Me、SFN对EPC细胞的LD50(48h)分别为2.5μM、22μM。在此基础上,通过Real-time PCR及Western blot技术,在细胞水平上验证了激活剂对Nrf2的激活效应。结果表明,CDDO-Me对EPC中Nrf2的激活效应有限。10μM的SFN能显著性增加Nrf2的核转运,上调Nrf2/ARE通路下游效应基因的表达,提高EPC的总抗氧化能力。但SFN介导的Nrf2激活对SVCV病毒的复制无显著性影响,尽管其G基因的相对转录水平呈现下降趋势。