论文部分内容阅读
目的一、检测患者血清中MMP-7表达水平，探讨其对胆管癌的临床诊断与鉴别诊断中的价值。二、检测患者胆汁中MMP-7表达水平，探讨其对胆管癌的临床诊断与鉴别诊断中的价值。材料和方法一、材料收集2011年12月至2012年6月在东方肝胆外科医院内镜科行ERCP诊疗的梗阻性黄疸患者（n=49）的血清和胆汁。胆管癌的诊断依据组织活检、细胞刷检、影像学诊断和临床随访。共收集到29位胆管癌患者和20位良性狭窄患者。二、 MMP-7及临床参数的检测（一）抽取患者空腹静脉血3ml，室温下静置3-4h，3000r/min离心10min，留取上清后于-80℃冰箱保存待测。（二）在注射造影剂之前收集胆汁且所有胆汁都源于梗阻或狭窄段以上，3000r/min离心10min，留取上清后于-80℃冰箱保存待测。（三）采用酶联免疫吸附实验法（ELISA）检测血清和胆汁中MMP-7表达水平。取出试剂盒，于室温（20-25℃）放置30分钟。取出酶标板，按照标准品的次序分别加入100μL的标准品溶液于空白微孔中。空白微孔中加入100μL的样品，空白对照加入100μL的蒸馏水。在各孔中加入50μL的酶标记溶液（不含空白对照孔）。将酶标板用封口胶封闭后，37℃孵育反应1小时。充分清洗酶标板5次，保持各孔有充足的水压。酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干。各孔加入显色剂A50μL，各孔加入显色剂B50μL。20-25℃下避光反应10分钟。各孔加入50μL终止液，终止反应。（四）血清中其他生化检查包括总胆红素(TB)、直接胆红素（DB）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、CA19-9、CEA在东方肝胆外科医院检验科用常规方法检测。三、统计分析采用SSPS20.0进行分析，计量资料两独立样本间的比较采用Mann-WhitneyU检验，计数资料样本间比较采用Pearson Chi-square检验。相关分析采用Spearman相关检验,绘制受试者工作特征曲线（ROC曲线），检验水准α=0.05。结果一、血清MMP-7表达胆管癌组（M5.47ng/ml,IQR4.26-6.81; x±SD5.42±0.30ng/ml）高于良性组（M4.22ng/ml,IQR3.82-4.82; x±SD4.28±0.19ng/ml），差别有统计学意义（P=0.009）。以为4.88ng/ml（AUC0.722，95%CI0.580-0.865）为界值血清MMP-7诊断胆管癌的敏感性为65.5%、特异性为80.0%。二、胆汁MMP-7表达胆管癌组（M9.01ng/ml,IQR8.24-10.78; x±SD10.05±0.69ng/ml）高于良性组（M7.64ng/ml,IQR7.02-8.70; x±SD8.26±0.443ng/ml），差别有统计学意义（P=0.012）；以8.32ng/ml（AUC0.713，95%CI0.564-0.862）为界值胆汁MMP-7诊断胆管癌的敏感性为75.9%、特异性为65.0%。三、血清、胆汁MMP-7表达水平与临床参数无明显相关性。结论血清、胆汁MMP-7可以作为诊断胆管癌的标记物,且对鉴别胆管癌和胆道良性病变有一定的意义。