生物玻璃/明胶/胶原复合支架的研究

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本文首先采用酸-酶结合法提取Ⅰ型胶原蛋白,并以聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、红外光谱(FTIR)、差示扫描量热法(DSC)等表征了所提取胶原的结构及热性能。由SDS-PAGE分析可知,在试样电泳谱带中出现了β条带、α1条带和α2条带。由红外光谱分析可判断提取的为Ⅰ型胶原。采用溶胶-凝胶技术制备了生物玻璃,并以红外光谱(FTIR)、粒径分析进行了表征。由红外光谱分析可知,1050 cm-1处是Si-O-Si的非对称伸缩振动峰,815 cm-1处是Si-O-H的对称伸缩振动峰,475 cm-1处是Si-O-Si的弯曲振动峰,以及606 cm-1处和560 cm-1处是无定形态P-O基团的弯曲振动峰,这些均为生物玻璃的红外光谱特征峰。制备的45S5型生物玻璃粒径在16μm左右。用3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)对制备的生物玻璃进行氨基化改性,通过与生物玻璃间的耦合化学反应,在生物玻璃表面修饰氨基。并采用红外光谱(FTIR)、粒径分析,研究了改性后的生物玻璃。在其红外光谱中,除生物玻璃的特征峰外,在695 cm-1处出现了N-H的特征峰,1550 cm-1处出现了N-H的弯曲振动峰,表明在生物玻璃表面有氨基存在。粒径分析可知,氨基化改性后45S5生物玻璃粒径为18μm左右。Zeta电位分析发现,APTES用量为3%(v/v)时,生物玻璃表面氨基数量最多,Zeta电位值为23 mV。将改性前后的生物玻璃分别与明胶、胶原蛋白复合,制备了生物玻璃/明胶/胶原复合支架。力学性能研究表明,该复合支架形变量为50%时的抗压强度为5.97 MPa。将生物玻璃氨基化改性后,制备的复合支架形变量50%时的抗压强度略有增加(6.24 MPa)。傅立叶红外光谱显示,氨基化改性生物玻璃与明胶、胶原间生成酰胺键,增强了复合支架的结构稳定性。将生物玻璃/明胶/胶原复合支架置于模拟体液中矿化,在扫描电镜下可观察到其表面生成了羟基磷灰石,且随着矿化时间的延长,生成的羟基磷灰石颗粒逐渐增多。生物玻璃/明胶/胶原复合支架于磷酸盐缓冲液(PBS)中降解28天后,其质量剩余25.25%,而氨基化改性生物玻璃/明胶/胶原复合支架的质量剩余32.96%,表明氨基化改性能够提高其无机相与有机相的界面相容性,从而提高复合支架的结构稳定性。细胞毒性研究表明,氨基化改性生物玻璃/明胶/胶原复合支架和生物玻璃/明胶/胶原复合支架反应级为0级或1级,可满足生物医用材料的要求。氨基化生物玻璃/明胶/胶原复合支架有望在骨组织修复中得到应用。
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