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本文研究目的:优选茜草炮制的最佳工艺,比较茜草、茜草炭的药理作用、止血机制以及血清药化方面的区别,为茜草、茜草炭临床分用提供药理学依据,分析茜草炭止血作用增强的可能原因,阐述其炮制原理;为进行二者的药代动力学研究提供参考。
研究方法:
1、炮制工艺的优选:摸索180℃、200℃、220℃、240℃、260℃五个温度段,每个温度设定10min、15min、20min三个烘制时间段对小鼠凝血时间的影响;求出t值,以此为指标采用正交表L93(4)进行分析,从中优选出最佳工艺组合。
2、药理作用和止血机制的比较,采用小鼠耳廓肿胀法比较茜草、茜草炭在抗炎作用方面的区别,利用热板法和扭体法来考察茜草炮制前后镇痛作用的变化,通过二者对地塞米松肌肉注射2周所致血瘀模型的影响来比较二者在活血化瘀方面的区别;测定小鼠凝血时间、出血时间、血小板计数、毛细管通透性、大鼠凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)以及对肝素和华发林所致病理性出血模型的影响,通过以上指标来探讨二者止血机制及其区别。
3、血清药物化学的比较,通过比较茜草、茜草炭甲醇部位、水溶性部位、给药及未给药大鼠血清的HPLC指纹图谱,比较二者在血清药化方面的区别。
研究结果:
1、茜草220℃,烘制10分钟为其最佳炮制工艺。
2、茜草炮制后,其抗炎、镇痛、活血化瘀、对抗肝素和华发林作用,升高血小板作用均相应降低(p<0.05);止血作用、降低小鼠毛细血管通透性、缩短大鼠TT、PT、APTT作用均显著增强(p<0.05)。
3、茜草、茜草炭通过水煎煮能够煎出大部分成分,并且在煎煮过程中成分发生了变化,给药组大鼠HPLC血清指纹图谱与空白组有明显不同,二者血清中成分有一定区别,茜草炮制过程中产生的新成分1,3-二羟基蒽醌在血清中没有发现。
研究结论:
1、茜草炮制后一系列药理作用降低,止血作用增强,其增强原因可能是通过抑制毛细血管通透性,升高Ca2+含量,缩短TT、PT、APTT,以及炮制过程中产生的1,3-二羟基蒽醌具有止血作用;茜草、茜草炭止血机制不同。
2、水煎煮能够煎出茜草、茜草炭大部分成分,给药组血清的HPLC指纹图谱与空白组明显不同,茜草炭比茜草血清中多出一个成分,对其血清药物化学的深入研究,将有助于阐明茜草、茜草炭的止血作用及其机理。