“调神畅情”针法对PD胃肠功能障碍模型大鼠不同部位自噬相关因子LC3、BECLin1蛋白表达的干预

来源 :黑龙江省中医药科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:itour123
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目的:通过观察鱼藤酮诱导的PD胃肠功能障碍模型大鼠中脑黑质、结肠组织中自噬相关因子LC3、Beclin1蛋白含量表达变化,探讨“调神畅情”针法对上述指标的影响以及相关作用机制。方法:选择成年SD大鼠,随机分为空白组、假手术组与造模组,采用浓度为2mg/kg鱼藤酮溶液按照每只2.5ml/kg的剂量进行腹腔注射建立PD胃肠功能障碍模型,每周5天,持续4周;假手术组用同等剂量的1.25%氯仿与4%的羧甲基纤维素钠溶液进行腹腔注射,周期一致,空白组不予任何处理。4周后用APO诱导攀爬实验检测成功后,再随机从空白组、假手术组各取2只、造模组取出8只大鼠采用检测粪便含水率和胃内容物残留率的方法进行胃肠功能障碍的测定。测定后将40只造模成功大鼠按相同方法分为调神畅情组、常规针刺组、模型组和西药组,加上空白组、假手术组,每组各10只,共六组大鼠。西药组给予75mg/kg的美多巴联合2mg/kg的多潘立酮,进行剂量为5ml/kg的灌胃干预治疗;假手术组予以5ml/kg的生理盐水进行灌胃干预治疗;调神针刺组:选取王顺教授“调神畅情三六九针法”中的穴位,百会透太阳、中脘、气海、神门、太冲、三阴交。统一使用0.25mm×25mm毫针(安迪牌),具体操作:百会透太阳,针刺深度为5mm,提插捻转幅度大,频率200次/分,留针期间行针9次;中脘、气海穴针刺深度为5mm,提插捻转幅度小,频率100次/分,留针期间行针6次;神门、三阴交、太冲针刺深度为3mm,只捻转不提插,频率50次/分,留针期间行针3次,留针30min。每天1次,连续治疗2周。针刺均由同一人操作调;常规针刺组选取“舞蹈震颤控制区”及“天枢”、“足三里”、“上巨虚”穴,针刺深度为5mm,常规针刺操作,进行干预治疗;各组每天1次,持续治疗2周。治疗2周后通过免疫组化法及蛋白印记法观察大鼠中脑黑质、结肠组织中的自噬相关因子LC3、Beclin1蛋白表达含量的变化。结果:1、通过免疫组化法及蛋白印记法观察大鼠中脑黑质组织中的LC3、Beclin1蛋白表达含量的变化。(1)与正常组相比,模型组的大鼠中脑黑质组织中的LC3、Beclin1含量明显降低(P<0.01),具有统计学意义。(2)与模型组相比,调神畅情组的大鼠中脑黑质组织中的LC3、Beclin1含量显著升高(P<0.01),具有统计学意义。(3)与模型组相比,常规针刺组的大鼠中脑黑质组织中的LC3、Beclin1含量明显升高(P<0.01),具有统计学意义。(4)与模型组相比,西药组的大鼠中脑黑质组织中的LC3、Beclin1含量略有升高(P<0.01),具有统计学意义。2、通过免疫组化法及蛋白印记法观察大鼠结肠组织中的LC3、Beclin1蛋白表达含量的变化。(1)与正常组相比,模型组的大鼠结肠组织中的LC3、Beclin1含量明显升高(P<0.01),具有统计学意义。(2)与模型组相比,调神畅情组的大鼠结肠组织中的LC3、Beclin1含量显著降低(P<0.01),具有统计学意义。(3)与模型组相比,常规针刺组的大鼠结肠组织中的LC3、Beclin1含量明显降低(P<0.01),具有统计学意义。(4)与模型组相比,西药组的大鼠结肠组织中的LC3、Beclin1含量略有降低(P<0.01),具有统计学意义。结论:1、在改善PD胃肠功能障碍模型大鼠行为学评分、大鼠粪便含水率和胃内固体食物残留率方面西药治疗效果最为明显,其次是“调神畅情”针法治疗,“调神畅情”针法治疗优于常规针刺治疗。2、PD胃肠功能障碍模型大鼠表现为脑组织中LC3、Beclin1含量明显降低,结肠组织中的LC3、Beclin1含量明显升高。3、“调神畅情”针法治疗能使PD胃肠功能障碍模型大鼠脑组织中LC3、Beclin1的含量明显升高,且优于常规针刺治疗;使结肠组织中LC3、Beclin1的含量明显降低,且优于常规针刺治疗。4、“调神畅情”针法治疗PD胃肠功能障碍的症状可能是通过调节自噬相关因子LC3、Beclin1在不同部位的含量来实现的。
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